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应用案例 | 冷冻型高通量组织研磨器处理小鼠胫骨样品的实验方案

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来源:市场资讯

(来源:新芝生物)

实验背景

小鼠胫骨是骨代谢、骨疾病、干细胞及分子生物学研究中的重要组织样本。在 DNA、RNA 提取、蛋白定量等检测中,需将坚硬致密的骨组织研磨成均匀细腻的粉末,以充分释放生物分子。然而,骨组织矿化程度高、质地坚硬,传统研磨方式难以彻底破碎,且易因产热导致核酸或蛋白质降解。本实验采用新芝生物高通量组织研磨器 SCIENTZ‑48L 对小鼠胫骨进行干磨处理,验证其在常温或低温条件下高效破碎骨组织的能力。

Part.01

传统研磨方法存在的痛点

  • 组织坚硬难破碎

骨组织矿化程度高、质地致密坚硬,传统研钵或手动匀浆难以将其彻底破碎,常残留骨渣,影响生物分子释放效率。

  • 成分易受热降解

研磨过程中产生的热量易导致 RNA、蛋白质等热敏性生物分子降解,影响后续 PCR、Western blot 等检测结果的准确性。

  • 易产生交叉污染

传统研磨工具清洗繁琐,多批次样品处理时易造成样品间交叉污染,影响实验可靠性。

  • 处理效率低下

手工研磨耗时费力,且重复性差,难以适应高通量样本处理需求,制约科研实验进度。

Part.02

实验准备

实验样品

小鼠胫骨组织

实验目的

验证新芝生物高通量组织研磨器 SCIENTZ‑48L 对小鼠胫骨的破碎效果,确保获得均匀细腻的骨组织粉末,满足 DNA/RNA 提取、蛋白分析、酶活性检测等后续分子生物学实验的要求。

实验耗材

2ml离心管、6mm研磨珠2颗,3mm研磨珠若干

实验设备


Part.03

实验步骤

样本准备:

取新鲜或冻存小鼠胫骨组织适量(约 50–100 mg),剔除附着软组织后置于2 ml 离心管中。若进行 RNA 提取,建议使用无 RNA 酶的专用离心管,并全程低温操作。

参数设置:

研磨频率:60Hz,单次运行时间:60秒,循环次数:6次,间歇暂停:5秒,本实验为干磨,无需添加任何溶剂。

进行研磨:

将离心管装入适配器,对称配平后锁紧舱门,启动研磨程序。设备通过高频三维振荡带动研磨珠高速撞击、剪切骨组织,实现细胞快速破碎。

结束取样:

研磨完成后,取出离心管,即可获得均匀细腻的骨组织粉末,无可见骨块残留。

Part.04

实验结果


左:研磨前:右:研磨后

经高通量组织研磨器 SCIENTZ‑48L处理后,小鼠胫骨由坚硬的骨组织转变为均匀细腻的粉末状,破碎充分,无肉眼可见骨渣残留。经后续检测,核酸完整性良好,蛋白质提取效率显著提升,满足分子生物学实验要求。

Part.05

注意事项

  1. 进行 DNA、RNA 或蛋白质提取时,建议使用预冷离心管,或采用间歇循环模式,避免样品升温导致生物分子降解。

  2. 新鲜组织建议采集后立即处理或快速冻存,避免反复冻融影响样品质量。

  3. 装样量不宜过多,以不超过离心管容量 1/3 为佳,确保研磨珠运动空间充足。

  4. 干磨过程务必盖紧管盖,防止骨粉飞溅、泄漏或交叉污染。

  5. 骨组织硬度较高,优先使用氧化锆研磨珠,提升破碎效果与耐用性。

实验结果表明,新芝生物高通量组织研磨器 SCIENTZ‑48L能够高效处理小鼠胫骨这类坚硬骨组织,在低温条件下实现细胞的充分破碎,获得均匀细腻的粉末样品。该方法操作简便、重复性好、通量高,有效避免了传统研磨方法中的产热降解和交叉污染问题,显著提升了生物样品前处理的效率与质量,适用于分子生物学、药物研发、病理检测及相关科研领域中的骨组织样品制备环节。

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