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聊一聊沉降​菌检测那些事!

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1.沉降菌原理

通过自然沉降,收集在空气中的生物粒子于培养基平皿中,在适宜的温湿度条件下,培养一定时间,让其繁殖到可见菌落进行计数,通过计数培养皿中的菌落数,来判定洁净环境中活的微生物数,并以此来评定洁净区域的洁净度。

2.人员要求

测试人员应经过微生物相关培训后,取得洁净区域负责人同意后进入检测。

3.检测用培养皿

一般采用直径φ90mm玻璃平板,经灭菌后,在无菌操作下,注入冷却至60℃左右的胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)或沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)或经验证过的培养基。加盖凝固(倒平板过程中手要稳,防止手抖造成培养基洒落;移动平板过程中动作要轻缓,防止动作过大,造成平板倾洒和摔落)。

4.检测过程

4.1凝固后的培养皿须通过传递窗传入洁净区域,传入前需严格消毒。

4.2根据规程中规定的布点图,将标记好的培养皿逐一放置,然后从里到外打开平皿盖,使培养基便面最大程度的暴露在环境中。

4.3静态测试:从里到外打开平皿盖,操作人员接着退出洁净区域,通过计时,保证打开平皿盖的培养皿在环境中暴露30min,这段时间内,禁止人员进出。

4.4动态测试:从里到外打开平皿盖,操作人员在洁净区域内正常工作,通过计时,保证打开平皿盖的培养皿在环境中暴露4h(不够4h,按照4h进行换算),这段时间内,操作人员正常进出洁净区域。

4.5采样结束后,将培养基倒置于恒温培养箱中培养。胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)置于30-35℃培养箱内培养3-5天;沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)置于20-25℃培养箱内培养5-7天。

5.菌落计数

5.1观察培养皿中的菌落数,并计数,对于不明显菌落,可用5-10倍放大镜检查,是否遗漏。

5.2若平板有2个或多个菌落重叠,可分辨,仍以2个或多个菌落数进行计数。

文章内容参考《中国药典》。

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