TPPA和TRUST联合检测在梅毒诊断中的应用

目的：评价TRUST与TPPA两种联合检测方法在梅毒诊断中的应用。

方法：用TPPA和TRUST两种方法同时检测患者血清标本中的梅毒螺旋体抗体，同时进行TRUST滴度测定，并对比检测结果。结果：对所有例数进行检测后，TPPA特异性为99.99%，TRUST特异性为98.85%，TPPA检测阳性率明显优于TRUST，差异具有显著统计学意义p＜0.05。结论：TPPA法优于TRUST法，可以作为梅毒的确诊实验，TRUST可作为疗效观察，判定复发或再感染指征。两种方法联合使用在检测梅毒诊断中具有重要的临床意义。

标签：TPPA；TRUST；梅毒诊断

梅毒是由苍白（梅毒）螺旋体感染引起的一种传播疾病。梅毒在感染人体后会产生特异性抗体、非特异性抗体，这些都是梅毒螺旋体在宿主细胞的类脂质和表面脂质产生的抗体，相关报告如下。

资料和方法

1.1一般资料

本组疑似梅毒患者，其中男504例，年龄18～59岁，女454例，年龄17～60岁。将其随机分为对照组、观察组，每组各479例，两组患者病程、年龄等比较，差异均无统计学意义P>0.05。

1.2主要试剂

我们采用上海荣盛生物药业有限公司提供的梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂（TRUST）和日本富士株式会社生产的TPPA试剂。所有血清样本均按照《全国临床检验操作规程》与试剂说明书操作。

1.3主要仪器

我们采用游目仪器（上海）有限公司提供的梅毒水平旋转仪。仪器均按WS/T491标准操作执行。

1.4方法

TRUST实验检测梅毒非特异性抗体时，在实验卡漆圈内加入待检血清50ul，在圈中均匀涂开，并且用生理盐水50ul将50ul血清作倍比稀释作滴度试验（为避免前带反应，滴度至少作到1：8），在每个漆圈内加入TRUST试剂17ul，置于水平旋转仪上以100R/Min频率水平混匀8分钟，判读实验结果。

做TPPA实验检测特异性抗体时，在U型反应板的第1—4孔中分别加入100、25、25、25ul血清稀释液，取待检血清25ul加入第1孔中，充分混匀后吸取25ul加入第2孔，再混匀，倍比稀释直至第4孔，最后吸取25ul弃去，用专用滴管在第3孔中加入未致敏粒子1滴，在第4孔中致敏粒子1滴，微量振荡器震荡均匀后，室温加盖水平静置两小时，观察结果。

1.5统计学方法

应用SPSS16.0统计学软件对上述治疗进行数据的分析，计量资料用卡方检验，确定P＜0.05差异具有统计学意义。

结果

对958份样品用TPPA和TRUST联合检测结果见表1，其中TPPA检测法特异性为99.99%；TRUST检测法特异性为98.85%。敏感度均为100%，TPPA检测阳性率明显优于TRUST，差异具有显著统计学意义p＜0.05

讨论

人体感染梅毒螺旋体后约6周可以检测出某些非特异性抗体，反应素，如卵脂质、心脂质等抗梅毒螺旋体破坏患者组织后释放出的某些物质抗体[3]。另外一种抗梅毒螺旋体产生的特异性抗体感染2周即可复查出。TRUST主要检测的是非特异性抗体，操作较简单，反应时间短，结果容易判读，但该实验方法的假阳性率较高，如肝炎、妊娠、及某些自身免疫性疾病均可引起该实验假阳性，很容易出现漏诊和误诊[4]。TPPA敏感性高，且患者一旦患有梅毒即使经过正规的治疗，往往终身阳性，TPPA不适合于对梅毒的疗效评估、复发和再感染的诊断。而TRUST检测可以作为疗效观察以及复发和再感染的指标，当血清滴度升高4倍或者高滴度（≥1：8）者，结合临床检测结果应当给予及时的治疗。

TRUST检测实验中，常常会出现TRUST1：1阴性或弱阳性，而随着血清稀释倍数的增加，反应强度却随着升高，即“前带反应”。试验中出现带现象是因为抗原或抗体过量的关系，通常抗原过量易于发生后带反应，抗体过量易于发生前带反应。所以，在日常的TRUST及滴度检测实验中，为避免前带反应对实验结果判读造成误导，滴度实验至少要做到1：8。在试验中我们发现TPPA检测出阳性率高于TRUST检测法，说明部分患者经过治疗已经痊愈，尤其在老年人之中尤为明显。因此，运用TPPA和TRUST联合检测梅毒抗体，并结合临床进行具体分析能够取得很大的临床应用价值。

TRUST法主要用于检测血清中的反应素，约感染6周后可查出，对早期梅毒辅助诊断能力差，但是TRUST滴度变化和梅毒治疗情况呈正相关，随着梅毒的治疗，抗体滴度下降，因此，适合用于梅毒治疗的疗效观察、随访和复发等有效诊断，对病情的评估有着重要的作用。此法操作简单，容易判读结果，它的滴度实验可以作为疗效观察的指标。但影响因素多，多种疾病可出现反应素导致假阳性结果，又由于感染梅毒后反应素的出现晚于梅毒特异性抗体，晚期梅毒时反应素又可能转阴。TRUST法不适用于一期梅毒早期、三期梅毒，对潜伏梅毒和神经梅毒也不敏感而导致假阴性结果，TRUST法不能单独用为梅毒的临床诊断。

梅毒特异性抗体从本质上又可以分为IgM和IgG两种，而以IgG形式存在的抗体是可以通过胎盘屏障进入胎儿体内的，所以，在诊断先天梅毒时，尤其要注意结合两种检测方法，同时结合患儿母亲的血清学检测结果综合判断，必要时要进行病原学检测或进行梅毒的IgM特异性抗体检测，只有这样，才能对患者做出最正确的诊断。