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产品名称:AF430 maleimide,AF430 马来酰亚胺的储存与操作规范
一、储存条件
温度控制:
长期储存:需在-20℃以下冰冻、干燥、避光环境保存,避免反复冻融(建议分装小份以减少解冻次数)。
短期保存:4℃避光条件下,水溶液可稳定保存5天;运输时可在室温(≤25℃)下短期(≤3周)保存,但需避免高温暴露。
避光与干燥:
严格避光(如铝箔包裹容器),防止光降解;保持干燥环境,避免潮湿导致马来酰亚胺基团水解或氧化。
惰性气体保护:
操作时建议通入氮气/氩气,减少氧化风险,尤其对敏感反应体系。
二、操作规范
溶解与配制:
溶剂选择:溶于DMSO、DMF、水等极性溶剂,建议现配现用(如DMSO溶解后稀释至PBS缓冲液)。
浓度控制:工作浓度通常为1-10 mM,需根据实验需求优化;避免高浓度导致聚集或非特异性结合。
反应条件优化:
pH与温度:与巯基(-SH)反应的最佳pH为6.5-7.5,温度37℃下30分钟可完成高效标记(反应速率常数达2×10³ M⁻¹s⁻¹),标记效率>90%。
特异性保障:仅与游离巯基反应,不与二硫键或氨基/羧基反应,确保位点特异性(如蛋白质半胱氨酸残基标记)。
反应产物稳定性:形成的硫醚键在生理条件下半衰期>72小时,光稳定性良好(连续激发1小时后荧光保留率约75%)。
避免干扰物质:
远离强还原剂(如DTT、β-巯基乙醇),防止马来酰亚胺基团还原;避免与金属离子、强氧化剂接触。
三、安全与生物相容性
细胞毒性:
低毒性(IC50>350 μM),适用于活细胞实验;标记后对细胞活性影响小,适合长时程追踪。
荧光特性:
激发波长430 nm,发射波长539-542 nm,量子产率0.68-0.90,斯托克斯位移105 nm,兼容标准荧光显微镜(如FITC通道)。
pH稳定性:pH 5.0-9.0范围内荧光强度变化<10%,适合酸性环境(如溶酶体)标记。
应用场景:
生物标记:蛋白质/抗体巯基标记、核酸适配体修饰、FRET探针构建。
活细胞成像:监测谷胱甘肽动态、膜蛋白迁移、氧化应激水平。
药物开发:ADCs(抗体-药物偶联物)连接、药物代谢追踪。
材料科学:纳米颗粒/水凝胶功能化、生物传感器构建。
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