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产品名称:AF488 C5 Maleimide,Alexa Fluor 488 C5马来酰亚胺的化学结构与核心特性
1. 化学结构与核心特性
荧光核心:基于Alexa Fluor 488染料,激发波长488 nm,发射波长520 nm,呈现明亮绿色荧光,适配激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等设备。
功能基团:
C5烷基链:五碳间隔臂(-C₅H₁₀-)增强标记灵活性,减少空间位阻,保护生物分子活性。
马来酰亚胺(Maleimide):与巯基(-SH)特异性反应生成稳定硫醚键,实现蛋白质、抗体、多肽等含半胱氨酸生物分子的共价标记。
水溶性优化:磺酸基团赋予水溶性,pH 4-10稳定,适合生理环境应用。
2. 物理性质与储存规范
形态与溶解性:固体粉末,溶于DMSO、DMF等有机溶剂,部分溶于水(需超声辅助)。
储存条件:避光、-20°C以下干燥保存;溶液需分装冻存(-20°C或-80°C),避免反复冻融;现配现用,防止马来酰亚胺水解失效(半衰期约15分钟,pH 7.4时)。
光稳定性:抗光漂白性强,适合长时间活细胞成像。
3. 生物标记应用场景
蛋白质与抗体标记:
标记IgG抗体用于免疫荧光(IF)、Western Blot、流式细胞术,检测细胞表面受体或胞内蛋白。
标记酶、抗原或核酸探针,用于酶活性分析、FISH(荧光原位杂交)或分子互作研究。
细胞与组织成像:
活细胞/固定细胞成像:共聚焦显微镜下追踪细胞结构、动态过程(如囊泡运输、细胞分裂)。
组织切片染色:结合免疫组化(IHC)技术,定位特定蛋白在组织中的分布。
纳米材料功能化:修饰量子点、脂质体或磁珠,用于细胞追踪、药物递送及生物传感。
多色标记兼容性:与AF405、AF594等染料无光谱重叠,适配多通道成像实验。
4. 反应条件与操作要点
反应体系:pH 6.5-7.5磷酸缓冲液中,目标分子(如蛋白质)与染料按1:10-1:50摩尔比混合,室温或4°C反应1-2小时。
纯化方法:透析、凝胶过滤(如Sephadex G-25)或超滤去除游离染料,避免背景干扰。
关键注意事项:
避光操作以防光漂白。
确认目标分子含可反应的巯基(如半胱氨酸残基),避免氨基或羟基干扰。
反应后需验证标记效率(如SDS-PAGE荧光扫描、荧光光谱分析)。
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