1例抗-M抗体干扰血型鉴定和交叉配血的案例分析

作者 | 尹丹 李小兰

单位 | 重庆两江新区人民医院 医学检验科

前 言

MNS血型系统是继ABO血型系统后第二个被识别的血型系统，迄今为止已发现了46种抗原，其中最重要的有M抗原、N抗原、S抗原、s抗原[1]。

抗-M抗体于1933年被首次发现，是MNS血型系统中最为常见的抗体，约占89.66%，是一种相对常见的天然抗体，大多数为IgM型，在室温下就能自然发生盐水凝集现象。有时可在37℃发生反应，表现为有临床意义的抗体，可导致迟发性溶血性输血反应和新生儿溶血病[2]。

MN血型鉴定试验已被欧美地区许多发达国家列为输血前的常规检测项目[3]。在输血前血型血清学检查中，不同性质的抗-M抗体亦可对实验造成一定干扰，影响结果的判读。笔者在临床工作中，就遇到1例抗-M抗体干扰血型鉴定和交叉配血的案例，现报道如下。

案例经过

患者，女性，58岁，既往体健，高血压10余年，已婚，婚后育有2女，无输血史。2023年6月7日因骑自行车不慎摔伤致全身多处流血及疼痛3小时。患者主诉当即觉全身多处疼痛，以右侧胸部疼痛及右足疼痛为主，伴右下肢及双手肢活动受限，右足背部皮肤撕裂持续流血，右额部头皮血肿持续流血，右眼框肿胀致视物模糊，无大小便失禁，无晕厥昏迷，无咳血咯血等不适，拨打急诊120后收住入院。

查体：患者生命体征平稳，入院后完善头部、胸部和足部CT，提示多发肋骨骨折，头皮血肿，右足未见明显骨折，以多发伤收住入我院骨科中心。胸部CT检查发现右肺上叶磨玻璃结节，结节可见分叶及毛刺，有胸膜牵拉征。经PET/CT检查，高度怀疑患者右肺上叶结节为恶性肿瘤，随即转至我院心胸外科拟行右肺上叶部分切除术及淋巴清扫。

实验室检测：

01

血型鉴定：

入院当日我科收到患者血型鉴定标本，具体检测结果如下：

1.1微柱凝集法：正定型为AB型RhD阳性，反定型A细胞和B细胞均有凝集，强度分别为2+和3+，提示正、反定型不相符，红细胞自身对照为阴性，考虑患者血浆中存在干扰物质影响了反定型检测。调取患者生化和凝血检测结果，球蛋白29.0 g/L，正常；纤维蛋白原，4.53g/L，仅轻度增高，排除上述两项干扰。

1.2试管法：为排除标本前处理因素对结果的影响，将标本再次离心处理后进行试管法检测，正定型为AB型RhD阳性，反定型A细胞和B细胞均凝集，强度均为2+，但O细胞无明显凝集。将反定型试管分别于4℃和37℃放置30min，4℃条件下凝集增强而37℃条件下凝集减弱。根据当前结果，高度怀疑为IgM型抗体干扰了反定型结果。

图1血型鉴定结果（微柱凝集法）

图2 生化检验结果

图3 凝血项检验结果

图4 血型鉴定结果（试管法）

02

不规则抗体筛查：

3个谱细胞均出现了凝集，分别为：1号谱细胞：2+，2号谱细胞：1+，3号谱细胞：3+。由于3个谱细胞有明显的凝集强度差异，故排除冷凝集素干扰，根据谱细胞格局表，可能为Kell、Duffy、Kidd、Lewis、MNS血型系统不规则抗体。

图5 不规则抗体筛查结果（微柱凝集法）

03

直接抗人球蛋白试验

阴性，间接抗人球蛋白试验阴性，Rh分型检测结果为CcDEe。

04

吸收试验

随机选取5份O型RhD阳性献血者压积红细胞等比例混合，盐水洗涤3次，将混合压积红细胞与等体积患者血浆于4℃吸收2小时后取上清液进行反定型检测。此时，正、反定型结果相符，患者血型为AB型RhD阳性。随后我科工作人员电话告知临床科室，患者不规则抗体筛查阳性且干扰了血型鉴定，若患者后续有用血需求，需提前备血。

图6 吸收试验后血型鉴定结果（微柱凝集法）

05

交叉配血

6月20日，我科收到该患者术前备血申请单，需准备AB型RhD阳性悬浮红细胞2个单位，随即用库存血同时采用3种方法进行了血液筛选，结果如表1所示：

表1 交叉配血结果

献血者1卡式法配血相合，但凝聚胺法和盐水法主侧均有凝聚；献血者2三种配血方法主侧均不相合。随后联系主管医生，经患者及家属同意，外送上级血型参比实验室进行疑难配血。结果为抗-M抗体阳性，并筛选M抗原为阴性且配血相合的血液作为备用。

图7 血型参比实验室疑难交叉配血结果

案例分析

在临床工作中，抗-M抗体多见于肿瘤患者、免疫性疾病患者、心脏手术患者、孕妇产前检查[2]。IgG型的抗-M抗体多见于恶性肿瘤及免疫性疾病患者；正常人群中多为IgM型的天然抗体。本案例中，患者术中及术后活检均报告为浸润型肺腺癌。

1.不同类型的抗-M抗体在血型鉴定和交叉配血中可能产生各种干扰检测及结果判定的情况，主要的处理策略主要包括以下几种方法[2,4]：（1）在不同反应条件下，采用盐水试管法进行血型鉴定；（2）进行不规则抗体筛选试验，若筛选试验阳性，应作进一步特异性抗体鉴定；（3）吸收试验排除抗-M抗体干扰进行血型鉴定；（4）可用巯基试剂（2-Me或DTT）处理标本破环IgM型抗体，以排除干扰；（5）采用不同的方法学进行交叉配血最大限度避免抗体漏检。

2.一旦检出抗-M抗体，应注意配合性输注与温度等问题：在输血和一些低温治疗时要特别关注MN血型的同型输注和温度等问题，由于IgM型抗-M抗体可诱导核心体温降低患者的体内溶血，特别是在神经手术、心脏手术等限制体温的手术中尤为重要。这类患者在术前应邀请输血科进行会诊，制定个体化的手术方案，以避免激活冷抗体，导致严重的凝集和溶血反应[5]。必要时进行MN血型的同型输注。

3.关注剂量效应：对红细胞抗原表达相关基础知识的掌握和理解有助于综合分析解释抗体筛查和鉴定试验过程中出现的反应性。剂量效应是指某些血型抗体的反应强度可能因红细胞上相应抗原剂量效应的不同而表现出差异性，即：抗体与具有双倍剂量抗原表达的红细胞（基因分型为纯合子）具有更强的反应性。不同类型的同种抗体，其抗原抗体反应剂量效应不同，Rh、MNS、Duffy和Kidd等血型系统中的大部分抗体会呈现出剂量效应[6]。分析本案例中卡式法交叉配血中，献血者1和献血者2结果的差异原因可能为前者为杂合子型（MN），后者为纯合子型（MM）。

4.不规则抗体筛查（抗筛）的临床意义：对有妊娠史或多次输血史的可能产生同种抗体的患者常规开展抗筛有十分重要的临床意义。抗筛为阳性的推荐输血前检查流程如下[7-9]：

（1）非紧急情况下，应进一步进行抗体鉴定试验，筛选对应抗原阴性的血液作为首选输注，盲配存在抗体效价降低或剂量效应所带来的漏检风险；

（2）在尚未确定抗体特异性又必须输血的情况下，可采用ABO、Rh和MN血型系统同型输注和相容性输注的原则，采用多种方法进行交叉配血；

（3）明确鉴定出抗体种类后，可为患者建立血型档案，进而规避患者在日后的治疗中输注含有对应抗原的血液。

我实验室与参比实验室的间接抗人球蛋白试验（间抗）结果有差异，分析原因可能是使用的商品化O细胞试剂不同导致，O细胞M抗原的表达缺失或者剂量效应可能是我实验室反定型结果中的O细胞和间抗结果为阴性的原因。

总 结

准确快速鉴定血型是确保输血安全的前提。我室验室采用吸收试验有效消除了抗-M抗体对血型鉴定的干扰，尽早明确了患者血型鉴定结果。在输血实践中，不同性质的抗-M抗体在不同的实验条件下表现有差异，应重视实验条件和方法学对不同性质抗体的检出敏感性。当确定有潜在临床意义的抗-M抗体时，筛选适宜的供血者进行配血，可有效降低输血不良反应的发生，提高输血治疗效果，保障患者输血安全。

参考文献

[1] Khalid S, Dantes R, Varghese S, et al. Naturally occurring anti M complicating ABO grouping [J]. Indian J Pathol Microbiol, 2011, 54(1):170-172.

[2]谢惠益,周载鑫,杨玥等.抗-M抗体影响血型鉴定及对临床输血的影响[J].临床输血与检验,2022,24(06):716-720.

[3] LEE E, BURGESS G, HALVERSON G R, et al. Applications of murine and humanized chimaeric monoclonal antibodies for red cell phenotyping [J]. Br J Haematol, 2004, 126 (2): 277-281.

[4]许亚莉,刘孟,张瑞宁等.高效价抗-M抗体对血型鉴定的影响及解决策略[J].临床血液学杂志,2021,34(12):878-881.

[5] KAMBIZA, MASOOMEHT, BEHROOZM, et al. Problems of Cold Agglutinins in Cardiac Surgery: How to Manage Cardiopulmonary Bypass and Myocardial Protection [J]. J Card Thorac Med.2014,2 (1):137-140.

[6]李喜莹,蔡鹃,甘佳等.红细胞血型抗体鉴定专家共识[J].中国输血杂志,2021,34(10):1061-1065+1175-1176.

[7]吴继博,马峰,岳彦伟等.不规则抗体筛查阳性患者输血策略的探讨[J].中国输血杂志,2018,31(08):831-833.

[8]《输血相容性检测标准》WS/T 794-2022.

[9]王翠碧,陈玮媛,熊磊群等.高效价抗-M抗体急诊输血的策略探讨——附1例交叉配血不合病例报告[J].实用检验医师杂志,2022,14(02):208-211.

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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼