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HIV抗体结果一阴一阳,孰对孰错?

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究竟该选择相信“谁”?

撰文丨龙丹阳 张青旭

化学发光免疫分析法(CLIA),是将化学发光与免疫分析有效结合起来的一种检测方法,其原理为发光物质(如鲁米诺、吖啶酯等)标记抗原或抗体进行反应,待磁性微粒、抗原、抗体发生反应后,在磁场的作用下,发光物质激发成中间体,当激发态中间体回到稳定的基态时,将发射出光子,且光子的产量与样品中抗原或抗体含量一致,最后通过自动发光分析仪分析光子产量,确定待测样品中抗原或抗体含量[1]。

相对比酶联免疫吸附试验(ELISA),化学发光法具有灵敏度高、检测快速、全自动化等优点[2],在临床上被广泛应用。当然,每种检测方法都有其局限性,化学发光法也会存在假阳性的情况。

案例经过

女,58岁,因手挫伤住院,入院查血常规、血凝、空腹血糖和传染病快速筛查。经查:血常规、血凝、空腹血糖结果均正常,传染病快速筛查乙肝、丙肝、梅毒螺旋体抗体均为阴性,HIV抗体检测结果为:采用化学发光法,S/CO值(针对一个样品检测结果的表现形式,其中S是样品的吸光度,CO是标准的吸光度)为120.61,结果判读为阳性;采用ELISA法,S/CO值为0.033,结果判读为阴性。

因两种方法学出现不一致的情况,需分析其原因,为排除标本因素,通知病人重新抽血。同时根据指南要求,HIV抗体出现有反应,需用另一种方法双管双孔复测。

原标本和重新抽血检测结果为:采用化学发光法,S/CO值为98.87/74.71,结果判读为阳性;采用ELISA法,S/CO值为0.041/0.036,结果判读为阴性。

标本送至长治市疾病预防控制中心,用免疫印迹法(Western blotting)进行确认试验,结果反馈为阴性。

针对这次HIV抗体两种方法学结果不一致的情况,进行了组内讨论,分析化学发光法出现假阳性的原因,因标本无溶血、脂血、黄疸等情况,排除其标本因素。本科室使用化学发光检测试剂生产厂家为太原市同创源科贸有限公司,试剂盒检测原理为体外定性检测人血清或血浆样本中的人类免疫缺陷病毒1/2型抗体和人类免疫缺陷病毒I型p24抗原。ELISA试剂生产厂家为英科新创科技股份有限公司,试剂盒检测原理为体外定性检测人血清或血浆样本中的人类免疫缺陷病毒1/2型抗体。ELISA 检测试剂目前分为第三代和第四代,其原理采用双抗原夹心检测 HIV-1/2 抗体,第四代是在第三代基础上包被了p24 抗体,检测抗体同时检测 P24 抗原,缩短了“窗口期”,提高其检出率[3]。

我们将标本送厂家复测,厂家给出结果如下:

迈克i3000结果仍为阳性,罗氏结果为阴性,将标本取10uL、50uL迈克i3000同批号试剂进行检测,结果显示存在干扰物质影响其检测。用HBT管(异嗜性抗体阻断剂)对标本进行处理,随后加50ul标本进行检测,结果数值降低但仍为阳性,说明干扰处理不完全;用6% PEG-6000(聚乙二醇,用来沉淀样本中的异嗜性抗体IgM)进行预处理,加50uL标本检测,结果为阴性。单独检测原料成分p24抗原、1/2型抗体和RF,显示p24抗原、HIV 2型抗体原料假阳性升高。

因此,得出结论:是由于IgM型异嗜性抗体和(或)其他大分子物质非特异性吸附检测p24抗原及2型抗体的原料导致高值,造成结果假阳性。

获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)经血液、血液透析、性接触传播、静脉吸毒等途径侵入感染人体而引起一种严重危害人类健康的传染性免疫性疾病[4];检测血清中HIV抗体是目前诊断AIDS的重要依据,对HIV感染者的诊断鉴别是谨慎而又严肃的,其结果要高度准确,但不同的检测方法之间可能会存在结果不一致情况,在临床检测工作中,遇到这种情况,需要分析其原因,发放准确的报告。

参考文献:

[1]王愉怀.化学发光免疫分析技术在临床检验中的应用[J].中国社区 师,2021,37(25):101-102.DOI:10.3969/j.issn.1007-614x.2021.25.048.2.

[2]黄慧慧.化学发光免疫分析法(CLIA)检测乙型肝炎标志物的临床应用与效果[J].世界最新医学信息文摘,2020,20(59):128-129.DOI:10.3969/j.issn.1671-3141.2020.59.07

[3] 谢阿青.化学发光微粒子免疫检测法初筛HIV高值假阳性1例[J].中国乡村医药,2022,29(14):84-85.DOI:10.3969/j.issn.1006-5180.2022.14.045.

[4] 詹诣,奚敏芬,顾颖慧,周强.化学发光免疫分析法与酶联免疫法检测艾滋病抗体时的对照分析[J].当代医学,2020,26(22):146-147.DOI:10.3969/j.issn.1009-4393.2020.22.059.

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本文来源丨检验医学网

责任编辑丨舒豪

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