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手把手教你用 GraphPad 绘制药物剂量反应曲线

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学肿瘤的亲们一定知道药物剂量反应曲线,先给大家普及一下知识:

IC50(half maximal inhibitory concentration) 是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。它能指示某一药物或者物质 (抑制剂) 在抑制某些生物程序 (或者是包含在此程序中的某些物质,比如酶,细胞受体或是微生物) 的半量。

在凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种药物诱导肿瘤细胞凋亡 50%,该浓度称为 50% 抑制浓度,即凋亡细胞与全部细胞数之比等于 50% 时所对应的浓度。IC50 值越低表示药物诱导凋亡的能力越强,某种细胞对药物的耐受程度越低。

IC50:只使用于体外(in vitro)实验中拮抗剂(antagonist)的效力,但一般不包括细胞水平。Y 随 X 增加而递减。

EC50:可使用于体外(in vitro)或体内(in vivo)的实验:体外一般是细胞水平激动剂或者拮抗剂特点表征;体内数据一般来自于动物。Y 随 X 增加而递增。

下面我们就讲解一下,如何使用 GraphPad Prism 绘制药物剂量反应曲线图,同时还可以利用 GraphPad Prism 自带的统计方法算出药物的 IC50 值。

1.打开 GraphPad Prism 8,按下图进行选择:

2.输入实验结果:这里为 3 复孔实验,Y1,Y2,Y3

①输入实验所使用的拮抗抑制剂浓度。

②如果想在一幅图画多条曲线,可继续在此输入新数据,如 Drug 2。

3.进行药物浓度变换,也就是 log 化:将 x 轴的浓度值转化成 Log [x],按下图进行选择 analyze,进一步点击 transform:

4.点击 transform 后进入下一级对话框,按下图进行选择后点击 OK:

5.之前输入的实验数据发生了变化:

6.利用非线性回归曲线对图上的点进行拟合。按下图进行选择拟合曲线种类:

7.在 Dose-response-inhibition(拮抗抑制剂剂量反应)子菜单里按下图选择 variable slope 项:

8.1点击 OK 后,自动生成拟合曲线,在 Data with Results 子菜单下的 Nonlin fit of Transform of Data1 的结果:

8.2以及该药物的 IC50 值:

9.进一步修饰曲线,双击曲线及曲线上的数据点,按下图进行选择,进一步修饰曲线的粗细、颜色、显示项目以及数据点的表现形式等。

看了以上的教程,你是否已经能够领悟 Ic50 的具体含义以及图形曲线绘制要领了呢?一定记住熟能生巧。

本文图片来源:作者提供

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