基本定义与结构
CY5-十二酰高丝氨酸内酯是将近红外荧光染料CY5与革兰氏阴性菌群体感应信号分子十二酰高丝氨酸内酯(C12-HSL)共价偶联形成的荧光探针,兼具群体感应信号活性与近红外荧光示踪能力。
- 十二酰高丝氨酸内酯(C12-HSL):分子式为C₁₆H₂₉NO₃,分子量283.41,是革兰氏阴性菌(如铜绿假单胞菌)的核心群体感应信号分子,通过与转录因子LasR结合,调控毒力因子分泌、生物膜形成、抗生素抗性等。
- CY5荧光染料:近红外染料,激发波长约650nm,发射波长约670nm,背景信号低,适合深层组织成像。
- 连接方式:CY5-NHS酯与C12-HSL内酯环开环后暴露的氨基反应,形成稳定的酰胺键。
十二酰高丝氨酸内酯结构式:
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十二酰高丝氨酸内酯
特性
- 双功能保留:偶联后仍能与LasR结合,激活下游基因表达,活性保留约70%~80%,同时具备高亮度、光稳定性好的近红外荧光特性。
- 光学优势:近红外区(650nm)激发,有效避开生物自发荧光干扰,实现低背景高信噪比成像,适合活体成像。
- 示踪能力:可实时追踪C12-HSL在细菌群落中的扩散和摄取路径。
合成、使用与保存建议
- 合成方法:将CY5-NHS酯溶于DMSO,与C12-HSL在pH8.0~8.5的条件下反应2~4小时,最后通过HPLC纯化即可得到产物。
- 溶液配制:建议用DMSO配制1~10mM母液,使用前用PBS或细菌培养基稀释至0.1~10μM工作浓度。
- 操作规范:全程避光操作,CY5对光敏感,尽量缩短光照时间;实验操作需佩戴手套和护目镜。
- 存储条件:-20℃严格避光保存,建议分装后按需取用,避免反复冻融。
温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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