Biocytin C2 mal的反应机制与条件优化，1248344-33-3

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产品名称：Biocytin C2 mal的反应机制与条件优化，1248344-33-3
一、反应机制与条件优化
反应原理：马来酰亚胺与巯基在温和条件（pH 6.5-7.5，室温/37℃）下快速反应，形成共价硫醚键。生物胞素部分通过链霉亲和素实现目标分子的捕获与检测。
关键条件：
pH控制：避免酸性/碱性极端环境，推荐PBS（含1 mM TCEP）或Tris-HCl缓冲液。
温度与时间：室温反应1-4小时，或37℃孵育1小时；分次添加试剂可提高标记效率。
浓度与比例：按巯基数量调整试剂用量（如每1 mL样品加20-160 μL储存液），避免过量导致非特异性结合。
纯化方法：反应后通过凝胶过滤（Sephadex G-25）、HPLC或离心滤膜去除游离试剂，纯度≥95%。
二、应用场景与功能表现
生物分子标记：
蛋白质/抗体标记：特异性修饰含巯基的蛋白质（如半胱氨酸残基），用于免疫沉淀、Western Blot、免疫组化及流式细胞术。
神经解剖学示踪：作为神经示踪剂，结合链霉亲和素标记物可视化大脑连接性，研究树突/轴突形态及神经回路。
蛋白质相互作用研究：标记半胱氨酸残基，解析蛋白质复合物动力学及细胞过程（如信号通路激活）。
药物递送与靶向治疗：偶联靶向配体（如抗体、多肽）或药物分子，实现肿瘤靶向递送及可控释放。
三、储存与操作规范
储存条件：
固态：避光、-20℃干燥保存，避免反复冻融；分装小份冷冻，延长保质期。
溶液：溶解于DMSO或含0.1% NaN₃的PBS中，-20℃保存≤1个月；工作液现配现用，避免降解。
操作规范：
安全防护：佩戴手套、护目镜，避免皮肤接触或吸入；废弃物按生物安全规范处理。
缓冲液选择：避免含游离巯基（如DTT、2-巯基乙醇）或竞争性试剂的缓冲液，防止副反应。
反应监控：通过SDS-PAGE、质谱或荧光检测验证标记效率与纯度。

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