产品名称:聚赖氨酸-胆固醇基因载体的制备方法
制备方法
1 化学修饰法
支化PLL合成:北京化工大学徐福建团队通过“一锅法”构建含双硫键的支化PLL(SS-HP),与胆固醇结合形成还原响应型载体。步骤包括:
赖氨酸与胱胺通过酰胺化反应得到SS-Lys。
SS-Lys与1,3,5-三缩水甘油-s-三嗪三酮(TGIC)开环反应生成支化PLL。
引入双硫键,使载体在还原性环境(如肿瘤细胞内)降解,释放DNA。
PLL-胆固醇共聚物:通过化学键合(如酯键或酰胺键)将胆固醇引入PLL侧链,形成共聚物。
2 物理混合法
脂质体包裹:将PLL-DNA复合物与胆固醇脂质体(如DSPE-胆固醇)混合,通过静电作用形成复合载体。例如:
PLL与DNA按质量比3:1混合,形成稳定复合物。
复合物与胆固醇脂质体通过超声处理或挤出法调节粒径至100-200 nm。
3 工艺优化
参数控制:
PLL与DNA比例:质量比3:1时转染效率最高,且复合物稳定性最佳。
溶剂盐浓度:在0.15 mol/L NaCl溶液中,复合物粒径随放置时间增长而增大,需控制制备时间。
超声处理:提高复合物均一性,减少聚集。
注意:用途仅用于科研,以上来自小编wyh,我们可以提供产品的定制服务
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