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华中农业大学生物固氮团队揭示苜蓿NAD1与自噬通路互作抑制根瘤免疫反应的调控机制

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豆科植物与根瘤菌共生互作产生根瘤,为豆科植物提供绝大部分的氮素来源。在根瘤中,大量根瘤菌定殖于侵染细胞内并发育为具有固氮能力的类菌体,与宿主细胞建立共生互惠的互作关系。然而,根瘤菌能否成功定殖,是决定根瘤高效固氮的关键因素之一。

华中农业大学生物固氮团队前期鉴定到蒺藜苜蓿结瘤不固氮突变体nad1(NODULES WITH ACTIVATED DEFENSE1)(Wang et al., 2016)。蒺藜苜蓿NAD1编码一个仅含有96个氨基酸的蛋白质,且含有两个跨膜域。值得注意的是,NAD1同源基因仅存在于结瘤固氮分子植物基因组中(Yu et al., 2024)。在蒺藜苜蓿中,NAD1的缺失会导致根瘤中免疫反应过度激活,从而阻止了根瘤菌的成功定殖并完全丧失固氮活性。然而,蒺藜苜蓿NAD1抑制根瘤免疫反应的分子机制仍然未知。

近日,该团队在New Phytologist在线发表了题为“MtNAD1 associates with autophagy complex to contribute to the degradation of immunity-related proteins in Medicago truncatula nodules”的研究论文,揭示了蒺藜苜蓿NAD1与自噬通路互作共同抑制根瘤免疫反应的分子机制。

该研究发现,MtNAD1能够与自噬通路关键组分—MtATG8s家族成员互作。在蒺藜苜蓿中,当Mtatg7基因敲除后,根瘤会提前衰老,且根瘤中免疫反应相关基因表达量显著上调。这表明,MtNAD1不仅与自噬通路互作,且自噬通路也可能参与根瘤中免疫反应的调控。

进一步研究发现,MtNAD1与多个免疫相关蛋白(如MtBI-1a,MtPR10,MtLYM1和MtLYM2等)互作,并介导这些蛋白含量在根瘤中的降低。在烟草表达体系中,当沉默自噬通路关键基因NbATG5时,MtNAD1对这些蛋白稳定性的影响减弱,这暗示MtNAD1可能通过自噬途径调节这些蛋白的稳定性。为了验证这一假设,作者随后借助于CIRSPR-Cas9技术构建了Mtbi-1a nad1双突变和Mtlym1 Mtlym2 nad1三突变体,这些突变植株产生的根瘤与nad1坏死根瘤菌相比,均表现出不同程度的恢复。以上结果证明了MtNAD1一个生物功能:通过与自噬通路互作共同抑制根瘤中的免疫反应,从而促进根瘤菌的成功定殖和根瘤固氮。

华中农业大学生命科学技术学院博士生董汝为该论文的第一作者为,曹扬荣教授与余海翔博士(目前任职于崖州湾国家实验室)为通讯作者,华南农业大学李发强教授参与了该工作。本研究得到国家自然科学基金、国家重点研发计划 、广东省自然科学基金以及重点实验室项目的支持。

论文链接:

https://doi.org/10.1111/nph.20336

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