发酵工艺中门冬氨酸鸟氨酸中消泡剂残留泡敌分析检测方法验证

门冬氨酸鸟氨酸发酵需要使用一些好氧菌种，在好氧菌种的作用下，生产发酵过程中会出现大量的泡沫，这些泡沫的存在影响发酵效率的同时还会导致一系列的生产问题，例如发酵液溢出导致的车间污染，菌种活动不正常等，这些生产问题会直接影响到生物制药企业的生产效率，并导致直接或间接的损失。

为了解决门冬氨酸鸟氨酸发酵生产的这一问题，最新的发酵工艺是在发酵液中加入少量的消泡剂，从而抑制泡沫的产生，微源检测实验室工程师从事生物制药行业多年，天分享一个方法，不仅仅重视门冬氨酸鸟氨酸中的消泡剂泡敌残留问题，还有助于我们在生产过程中做好消泡剂的残留测定。

仪器和试剂：高效液相色谱仪 Agilent1260，电子天平XPR205，三氟乙酸，实验室自制水

方法要求和结果：

供试品溶液制备：取供试品约100mg，精密称定，置于5mL容量瓶中，加入稀释液溶解定容。平行配制2份。

专属性溶液配制对照储备液：称取一定量的消泡剂，置于100mL容量瓶中，加入稀释液溶解并定容至刻度，即得。

线性50%溶液：移取对照储备液0.5mL于20mL容量瓶中，加入稀释液定容至刻度，即得。再依据同样方法得到线性100%溶液及线性200%溶液。

供试品溶液：精密称定门冬氨酸鸟氨酸，置于10mL容量瓶中，加入稀释液溶解定容，即得。

供试品加标溶液：精密称定门冬氨酸鸟氨酸，置于10mL容量瓶中，并加入对照储备液0.5mL，加入稀释液溶解定容，即得。

仪器基线平直后，进空白溶液2针，对照溶液6针，空白溶液1针，线性溶液各1针，空白溶液1针，供试品溶液1针，供试品加标溶液1针，对照溶液1针（回针）；空白溶液对消泡剂检测无明显干扰， 6针对照溶液的峰面积RSD≤10%，6针对照溶液加上回针一共7针的消泡剂峰面积RSD≤10%，线性相关系数r≥0.99。供试品加标溶液回收率在80%~120%之间。门冬氨酸鸟氨酸中消泡剂残留检测方法验证结果，符合可接受标准。此方法有较好的专属性和准确度，适用于样品门冬氨酸鸟氨酸中消泡剂（泡敌）的检测。