江苏
在蛋白提取与下游实验中，蛋白酶降解是导致实验结果不理想的头号“隐形杀手”。无论是Western Blot条带扩散，还是蛋白纯化得率较低，背后往往都藏着潜在的“破坏者”—内源性蛋白酶。因此，高效、广谱地抑制蛋白酶活性，是实验成功的关键所在。
如何选择：告别传统思维，让数据更可靠！
许多实验者误以为所有细胞类型都适用同一种蛋白酶抑制剂。实际上，不同组织（如脑、肝、胰腺）或细胞系（如HEK293、HeLa、巨噬细胞）的内源性蛋白酶含量存在着显著差异。因此，最好选择综合型、通用型的蛋白酶抑制剂，能够同时抑制多种蛋白酶的存在，从而达到理想的蛋白提取效果。我们实验室尝试过多种国内外品牌的蛋白酶抑制剂进行蛋白提取，有Starvio、MCE、Roche等，发现性能都很不错，归因于这些品牌的抑制剂真正做到了综合型和通用型这两点，它们针对的不仅仅是某一类或几类蛋白酶，而是多种蛋白酶，从而确保了我们在蛋白提取中，无论哪种蛋白酶被激活，都能够被迅速“制服”，使我们的目标蛋白不受蛋白酶降解的影响，因此得到的目标蛋白条带明显增粗、无拖尾，并且高分子量蛋白的保留量也有提升。同时，各种组分稳定性较好，在实验操作过程中抑制活性保持率较高，减少了在实验中途反复添加的麻烦。最终体现在WB膜上的是锐利、均一的条带。
多功能协同作用
我的实验样本是小鼠的肝脏组织，其中含有较多种类的蛋白酶。在使用Starvio、MCE等品牌的蛋白酶抑制剂进行蛋白提取实验时，它们能够对样本中多种内源性蛋白酶同时达到较好的抑制效果，而使用其它品牌的抑制剂进行实验时，发现能够抑制的蛋白酶种类就没有这么多，效果也没有那么好。综合分析下来，抑制效果较好的通用型蛋白酶抑制剂，之所以能够同时对多种内源性蛋白酶起作用，往往是含有多种活性成分，如AEBSF、Aprotinin、Bestatin、Leupeptin、E-64、Pepstatin A及EDTA，如此一来，能够实现对丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、巯基蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和金属蛋白酶等多家族不同亚型蛋白酶的全方面覆盖，Starvio、MCE、Roche等品牌也都做到了这一点。值得一提是，其中，AEBSF作为丝氨酸蛋白酶的高效抑制剂，水溶性好、毒性低，相较于传统所采用的PMSF更加稳定安全。EDTA的加入也能够有效螯合金属离子，为金属蛋白酶活性加上双重保障。
多场景应用广泛
再来说说应用场景。从基础蛋白纯化到免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（Co-IP），从Pull-down实验到WB、IF、IHC等，是众多科研人员日常所要进行的一些生物学实验，在这些实验中蛋白酶抑制剂不可或缺，这就要求我们所选用的抑制剂能够稳定地发挥效用。同时，对于需要维持蛋白质天然构象的Co-IP或Pull-down实验，我们发现相比于其它试剂，Starvio抑制剂中不含有高浓度的还原剂，对非共价相互作用影响非常小，因此保证了复合物分析结果的准确性。还有更重要的一点，像我们实验室对蛋白酶抑制剂的用量比较大，多品牌抑制剂的性能和价格比较下来Starvio的性价比最高，货期也比进口试剂短，是更适合我们国内科研者的“体质”。
总而言之，选择一款通用、高效的蛋白酶抑制剂，是保障蛋白提取实验成功的第一步。正在被蛋白降解或条带不清所困扰的实验人员们，看过来！！！在经费充足的情况下，可以选择MCE、Roche等国外品牌来解决你的烦恼；如果想要性价比更高，分析结果更精准的朋友们，可以选择Starvio通用高效蛋白酶抑制剂，在解决困扰的同时，让你怒省一笔实验经费。
特别声明：以上内容(如有图片或视频亦包括在内)为自媒体平台“网易号”用户上传并发布，本平台仅提供信息存储服务。
Notice: The content above (including the pictures and videos if any) is uploaded and posted by a user of NetEase Hao, which is a social media platform and only provides information storage services.
