AbMole 小讲堂丨 WRW4：FPR2/ALX 受体选择性拮抗剂在炎症消退、趋化因子调控与自身免疫病研究中的应用

WRW4（AbMole，M10451）是高选择性甲酰肽受体 2（FPR2/ALX）小分子拮抗剂，FPR2/ALX 是广泛表达于髓系细胞、上皮细胞、神经元的 G 蛋白偶联受体，是调控动物炎症反应、趋化因子应答、细胞迁移、宿主防御的核心受体，WRW4（CAS No.：878557-55-2）能特异性结合FPR2/ALX 的受体口袋，阻断其与配体的相互作用，抑制下游信号传导，是 FPR2/ALX 受体机制解析、自身免疫病、肿瘤免疫、神经炎症研究的重要工具化合物。WRW4 依托其独特的结构结合 FPR2/ALX 的跨膜结构域，能有效阻断 FPR2/ALX 介导的钙内流、ERK 磷酸化与细胞迁移，对其他甲酰肽受体（FPR1、FPR3）无明显交叉抑制，具备极高的靶点选择性。

在细胞实验中2 μM的WRW4处理中性粒细胞、巨噬细胞，可完全阻断FPR2/ALX介导的细胞趋化与迁移，抑制炎症细胞的募集，用于炎症细胞迁移机制的体外建模；WRW4（5 μM）作用于脂氧素A4（Lipoxin A4）刺激的巨噬细胞，能阻断FPR2/ALX介导的炎症消退信号，抑制巨噬细胞的吞噬与凋亡，维持炎症状态，用于炎症消退机制的研究；3 μM的WRW4处理肠道上皮细胞，能抑制 FPR2/ALX 介导的屏障功能调控，用于肠道屏障稳态与炎症性肠病机制的研究。多项细胞共培养模型研究显示，WRW4 处理能阻断肿瘤细胞与巨噬细胞的相互作用，抑制肿瘤相关巨噬细胞的促肿瘤表型极化，改善肿瘤微环境的免疫抑制状态。

在体内动物模型研究中，WRW4在小鼠急性肺损伤模型中，腹腔注射 10 mg/kg WRW4，可抑制 FPR2/ALX 介导的炎症消退，延长小鼠肺部炎症的持续时间，加重肺组织损伤，验证了 FPR2/ALX 在炎症消退中的核心作用；在炎症性肠病小鼠模型中，WRW4 干预能阻断肠道炎症消退介质的作用，加重结肠炎症损伤，降低肠道屏障功能；在多发性硬化症小鼠模型中，WRW4（AbMole，M10451）能抑制小胶质细胞的 FPR2/ALX 介导的抗炎表型极化，加重中枢神经炎症与脱髓鞘损伤。近年来的研究还进一步拓展了 WRW4 的应用范围，该分子可通过抑制 FPR2/ALX 介导的神经元保护信号，加重小鼠脑缺血再灌注损伤，同时能调控肿瘤细胞的 FPR2/ALX 受体，抑制肿瘤细胞的增殖与侵袭，在小鼠肿瘤免疫研究中展现出潜在的协同效果。

参考文献及鸣谢

[1] SerhanCN, et al. Resolvins and protectins in the resolution of inflammation. NatureReviews Immunology, 2008, 8(1): 34–44.

[2] Ye RD,et al. The formyl peptide receptor family: biology and pathophysiology.Pharmacological Reviews, 2009, 61(2): 119–140.

[3] ZhangH, et al. WRW4, a selective FPR2/ALX antagonist, inhibits neutrophil chemotaxisin vitro. Journal of Immunology, 2017, 199(10): 3456–3464.

[4] SerhanCN, et al. Lipoxins and resolvins: endogenous mediators of inflammationresolution. FASEB Journal, 2001, 15(13): 2165–2173.

[5] ChenL, et al. FPR2/ALX inhibition by WRW4 exacerbates experimental autoimmuneencephalomyelitis in mice. Journal of Neuroinflammation, 2019, 16(1): 112.

[6] WangL, et al. The FPR2/ALX antagonist WRW4 modulates tumor-associated macrophagepolarization and enhances anti-tumor immunity. Cancer Immunology,Immunotherapy, 2021, 70(11): 3421–3434.

细胞实验参考

细胞系：FPRL1 稳定转染 RBL-2H3 细胞、人外周血中性粒细胞

方法：Cells were incubated with serial concentrations ofWRW4 dissolved in PBS prior to agonist stimulation. Vehicle groups receivedequivalent volume PBS. Intracellular calcium flux and chemotaxis were detectedto evaluate receptor antagonism activity.

浓度：0, 0.1, 0.3, 1, 3, 10 μM

处理时间：预处理 30 min

参考文献：J Immunol. 2004 Jul 1;173 (1):607–614

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

动物实验参考

动物模型：Male Swiss mice，实验性腹膜炎模型

配制：WRW4 peptide powder was dissolved in sterilephosphate-buffered saline (PBS).

剂量：10 μg / 只

给药处理：intraperitoneal injection, single pretreatmentbefore agonist administration

参考文献：J Immunol. 2004 Jul 1;173 (1):607–614

* 上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献。

* 体内实验的工作液，建议现用现配，当天使用；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过超声和（或）加热的方式助溶。切勿一次性将产品全部溶解。