陕西
产品名称：Alexa Fluor 350-NeutrAvidin，Alexa Fluor 350 标记中性亲和素的双重作用机制与核心优势
一、试剂基础组成与核心理化参数
标准英文：Alexa Fluor 350 NeutrAvidin，简称 AF350-NeutrAvidin，由去糖基化中性亲和素与磺化香豆素类 AF350 荧光染料经酰胺键共价偶联而成，是低背景蓝色荧光生物素检测探针。
蛋白骨架 NeutrAvidin：蛋清亲和素脱糖修饰产物，分子量 60 kDa，四聚体结构，4 个独立生物素结合位点，结合常数 Kd≈10⁻¹⁵ M；等电点 pI=6.3，无糖基凝集素结合位点，大幅降低组织、细胞非特异性吸附，优于天然亲和素与链霉亲和素。
荧光基团 AF350：水溶性磺化香豆素，Ex=346 nm，Em=442 nm，量子产率 0.73，pH 4–10 荧光信号稳定，斯托克斯位移大，与 AF488、Cy3、Cy5 光谱几乎无重叠，适配多色共定位成像。
产品质控：冻干粉 / 无菌缓冲液液体，纯度≥95%，染料蛋白标记比 D/P=2–4；可溶于 PBS、HEPES 等中性缓冲液，耐受常规免疫实验环境。
二、双重作用机制与核心优势
2.1 生物素特异性识别机制
依靠 NeutrAvidin 四聚体口袋特异性捕获生物素修饰抗体、核酸、多肽、脂质体，结合不可逆、条件温和，实现信号放大，适配 ICC、IHC、FISH 等低丰度靶标检测。
2.2 相比同类探针独有优势
低背景干扰：脱糖消除凝集素非特异结合，中性等电点减少静电吸附，切片自发荧光远低于普通亲和素偶联物；
蓝光通道优选：发射波长短于 AMCA，与绿色荧光串色更少，可替代 DAPI 标记胞内靶标，避免仅细胞核单通道局限；
蛋白活性保留：偶联反应温和，不破坏 NeutrAvidin 生物素结合能力，无 RYG 序列带来的假阳性干扰；
水溶性良好：磺化染料无疏水聚集，高浓度孵育不产生沉淀。
三、标准化实验操作要点
样本预处理：石蜡切片需抗原修复，细胞样本 0.1% Triton 透化；内源性生物素丰富组织（肝肾）提前用生物素封闭液孵育，阻断背景信号。
孵育流程：生物素化一抗室温结合靶标后，稀释 AF350-NeutrAvidin 至 1–15 μg/mL，避光室温孵育 30–60 min，PBS 充分漂洗去除游离探针。
成像配套：搭配紫外激发光源，使用抗荧光淬灭封片剂；缩短共聚焦扫描时长，缓解 AF350 轻度光漂白问题。
状态：固体/粉末/溶液
保存：冷藏
文章来自西安齐岳生物小编wyh。
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