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FITC-25-羟基胆甾醇（FITC-25-Hydroxycholesterol，FITC-25-HC）是一种将荧光素异硫氰酸酯（FITC）与25-羟基胆甾醇（25-Hydroxycholesterol，25-HC）通过化学键结合形成的荧光标记化合物，在生物医学研究领域具有重要应用价值。
一、化学结构与性质
组成
FITC-25-HC由FITC荧光基团和25-HC分子通过共价键结合而成。FITC的异硫氰酸基团与25-HC的羟基或氨基发生反应，形成稳定的硫脲键或酰胺键。
外观与溶解性
- 通常为白色或类白色粉末或固体。
- 溶于有机溶剂（如DMSO、乙醇、丙酮），在水中的溶解性较低，但可通过脂质体或表面活性剂辅助溶解。
荧光特性
- 激发波长：约495 nm（黄-橙色）。
- 发射波长：约525 nm（黄-绿色）。
- 荧光强度受pH、温度及光照影响，需避光保存于-20℃或更低温度以保持稳定性。
FITC-25-Hydroxycholesterol，FITC-25-羟基胆甾醇
二、合成方法
FITC-25-HC的合成通常包括以下步骤：
- 活化25-HC：通过化学修饰（如引入氨基或羧基）提高其反应活性。
- FITC偶联：在适当条件下（如pH 8-9、室温），FITC的异硫氰酸基团与25-HC的活化基团发生反应，形成共价键。
- 纯化：通过色谱法（如HPLC）或结晶法分离纯化目标产物。
三、使用注意事项
- 储存条件：避光保存于-20℃或更低温度，防止荧光淬灭。
- 实验条件优化：pH、温度及溶液离子强度可能影响荧光信号，需根据具体实验优化条件。
- 细胞毒性：25-HC在高浓度下可能对细胞有毒性，需确定适宜浓度。
- 安全防护：25-HC对皮肤和眼睛有刺激性，操作时应佩戴防护设备。
温馨提示：供应产品仅用于科研，不能用于人体！
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