肝硬化门静脉血栓患者炎症标志物和微生物群的比较：一项回顾研究——专栏特辑

前言

“国际肝病-肝脏血管病专栏”是北部战区总医院消化内科祁兴顺医生应《国际肝病》编辑部邀请联合发起的学术专栏，定期收集整理肝脏血管病领域的研究进展，每两周（周三）挑选一篇重要文献进行精读讨论，希望能帮助读者知其然知其所以然，启迪临床科研思维、学以致用。

为进一步丰富专栏内容、促进多学科交流，现推出“肝脏血管病”专栏特辑，邀请全国从事肝脏血管病研究的临床医生、科研学者及专家团队，共同打造高质量、高影响力的学术平台。本期文章由河北省人民医院白云教授及其团队特约撰稿。

文章简述

门静脉血栓形成（ PVT ）是指门静脉主干和／或肝内门静脉左、右支血栓形成，伴有或不伴有肠系膜静脉和脾静脉血栓形成。PVT是肝硬化晚期患者最常见的并发症之一，代偿期肝硬化患者中发生率为10%，失代偿期肝硬化患者中为5%-18%，肝移植患者中达26%。PVT与肝损伤严重程度相关，其患病率和累积发病率与肝功能储备丧失及肝功能下降相关，进而影响肝硬化患者的预后。PVT形成的潜在机制是多方面的。广为认可的Virchow理论（包括血流减少、高凝状态和血管内皮损伤）认为静脉血栓形成同样适用于PVT。具体而言，Kinjo等研究显示PVT患者的门静脉血流显著减少；Xing等发现合并PVT的肝硬化患者高凝标志物水平显著高于未合并PVT的肝硬化患者；Guo等通过大鼠模型证实了血管内皮损伤在PVT发生中的作用。然而，除上述因素外，PVT可能与细菌易位、内毒素血症及全身性炎症相关。脂多糖（LPS）已被确认为关键因素，其在促进炎症介质（如IL-6、IL-8、TNFα）释放中起重要作用。此外，它通过增加氧化应激（sNox2-dp）来增强血小板黏附、聚集、活化及血栓形成。同时，其他研究报道细菌易位及细菌产物，例如内毒素可导致肝性脑病和自发性细菌性腹膜炎，这些情况也可能增加炎症标志物水平。理论上，尽管PVT与肠道菌群改变的机制尚未完全阐明，但既往研究已证实PVT与肠道菌群失调存在关联——当微生物群失调引发肠道屏障功能障碍时，脂多糖可能进入体循环，而PVT与血液微生物群失调的关系也未被充分研究。鉴于PVT发生机制复杂且相互关联，全面理解各因素间的相互作用至关重要。因此，本研究旨在探讨肝硬化合并PVT患者的炎症标志物及肠道菌群变化。

重要研究结果分析及临床意义
01 患者特征

表1 基线特征

（表源自文献）

最终分析纳入了28例接受经颈静脉肝内门体分流术（TIPS）的肝硬化患者，其中12例合并门静脉血栓（PVT）的患者被归类为PVT组，16例被归类为非PVT组。与非PVT组患者相比，PVT组患者的D-二聚体水平显著更高[3.50（1.37–12.81）vs. 1.46（0.83–3.37），P=0.028]，而其他基本特征和实验室检查结果方面，两组在年龄、性别分布、BMI、PLT、白蛋白、总胆红素、肌酐、PT、PTA、FIB、INR、Child-push评分、Child-push分级和MELD评分方面均无显著差异（所有P>0.05）（表1）。

结果显示，LPS（34.42 vs. 13.59 pg/mL，P<0.05）、IL-6（38.46 vs. 18.76 pg/mL，P<0.05）、 TNFα（46.74 vs. 18.92 pg/mL，P<0.05）和sNox2-dp（13.03 vs. 5.13 pg/mL，P<0.05）在PVT组患者获取的门静脉血中均显著升高（表2；图1）。而外周静脉血中上述炎症标志物无统计学显著差异，炎症水平分别为LPS（20.61 vs. 11.55 pg/mL，P>0.05）、IL-6（29.35 vs. 13.63 pg/mL，P>0.05）、IL-8（46.74 vs. 50.96 pg/mL，P>0.05）、 TNFα（38.45 vs. 28.08 pg/mL，P>0.05）和sNox2-dp（7.50 vs. 4.69 pg/mL，P>0.05）（表2；图2）。

比较门静脉血与外周静脉血中炎症标志物的浓度，结果显示在28例肝硬化患者中，LPS（23.37 vs. 18.79 pg/mL，P<0.05）、IL-6（29.85 vs. 24.95 pg/mL，P<0.05）、IL-8（79.64 vs. 67.84 pg/mL，P<0.05）、 TNFα（38.24 vs. 34.46 pg/mL，P<0.05）和sNox2-dp（9.53 vs. 7.89 pg/mL，P<0.05) 在门静脉血中均较高（表3；补充图S1）。亚组分析显示，在PVT组患者中，LPS浓度（29.76 vs. 19.92 pg/mL，P<0.05）、IL-6（38.53 vs. 31.56 pg/mL，P<0.05）、IL-8（93.28 vs.77.05 pg/mL，P<0.05）、 TNFα（48.60 vs. 40.55 pg/mL，P<0.05）以及sNox2-dp（12.45 vs. 7.38 pg/mL，P<0.05）在门静脉血中的浓度也高于外周静脉血（表3；补充图S2）。

观察到LPS与IL-6呈正相关（r=0.3408，P=0.044），IL-8（r=0.04971，P=0.001），TNFα（r=0.3854，P=0.003），以及sNox2-dp（r=0.4007，P=0.027）（图3）。

微生物群组成分析显示，肝硬化PVT患者与非肝硬化PVT患者的门静脉血微生物群中包含四个门，其中肝硬化PVT患者门静脉血中变形菌门的相对丰度高于非肝硬化PVT患者（67.03% vs. 60.45%），但厚壁菌门_D（9.01% vs. 6.97%）、放线菌门（7.26% vs. 10.05%）和厚壁菌门_A（4.51% vs.6.31%）肝硬化PVT患者的门静脉血液多样性指数低于肝硬化非PVT患者（图4A）。Chao1（P=0.004）和Shannon（P=0.022）多样性指数显示肝硬化PVT患者与非PVT患者的门静脉血液α多样性存在显著差异（图4B）。Bray-Curtis距离算法也揭示了肝硬化PVT患者与非肝硬化PVT患者的门静脉血液微生物群β多样性存在显著差异（P<0.05）（图4C）。以LDA评分（log10）=2作为筛查重要细菌生物标志物的临界值，LEfSe分析探索了43种在肝硬化PVT患者与非PVT患者门静脉血中存在显著差异的菌种，其中2种（假单胞菌属、微杆菌科）在肝硬化PVT患者门静脉血菌群中显著富集，而其余40种（伯克霍尔德菌目、伯克霍尔德菌目、鞘氨醇单胞菌属、鞘氨醇单胞菌目、芽单胞菌目等）在肝硬化非PVT患者门静脉菌群中显著富集（图4D）。

微生物群组成分析显示，12例肝硬化门静脉周围静脉血微生物群包含四个门，其中变形菌门最为丰富，其次为厚壁菌门、放线菌门和拟杆菌门。门静脉血中变形菌门的相对丰度高于外周血（67.03% vs. 59.05%），但低于外周血中的放线菌门（7.26% vs. 8.90%）、拟杆菌门（3.79% vs. 8.85%）和厚壁菌门-D（9.01% vs. 14.50%）（图5A）。细菌α多样性分析显示肝硬化门静脉血患者门静脉血与外周血间无显著差异（chao1：P=0.36；Shannon：P=0.82）（图5B）。Bray Curtis距离算法表明肝硬化门静脉血患者门静脉血与外周血间细菌β多样性无显著差异（图5C）。以LDA值（log10）=2作为截断值筛选重要细菌生物标志物时，LEfSe分析显示门静脉血中硝化螺菌门和黄杆菌科显著富集（图5D）。

总结展望

本研究发现，门静脉血中的炎症标志物浓度高于外周静脉血；而肝硬化合并PVT患者的门静脉血中炎症标志物浓度，甚至高于非PVT患者。门静脉血中微生物群组成在PVT与非PVT肝硬化患者间亦存在显著差异。

多中心研究合作单位招募

项目（一）肝硬化门静脉血栓患病率的多中心回顾性研究单位招募

门静脉血栓（PVT），尤其是完全阻塞性PVT，可增加肝硬化患者门静脉压力，进而增加腹水、食管胃静脉曲张破裂出血的风险。当前，妥善处理肝硬化门静脉血栓仍是棘手的临床问题。另外，肝硬化PVT的患病率也尚不明确，国内更是缺乏大型流行病学研究阐明这一问题。为此，北部战区总医院消化内科牵头开展了一项全国多中心回顾性研究，基于增强CT检查结果以明确肝硬化患者PVT的患病率，并进一步回顾性分析相关危险因素。现诚挚邀请消化科、肝病科、感染科和放射科等相关专业医生参与。

项目（二）内镜时机对肝硬化伴急性静脉曲张出血患者预后影响的多中心随机对照试验研究单位招募

肝硬化患者中，急性静脉曲张出血发病率为25%-40%，6周死亡率为10%-20%。内镜检查属于有创操作，且内镜下静脉曲张治疗对操作者的技术要求高。尽管内镜检查是肝硬化伴急性静脉曲张出血的重要选择，但内镜时机对肝硬化急性静脉曲张出血患者结局的影响仍存在争议。为此，北部战区总医院消化内科牵头开展了一项国际多中心随机对照试验，现诚挚邀请具备内镜下食管胃静脉曲张出血治疗条件的相关科室医生参与。

项目（三）肝硬化显性肝性脑病输注人血白蛋白的疗效的多中心随机对照试验研究单位招募

肝硬化是慢性肝病的终末期阶段，肝硬化患者肝性脑病发生率为30-40%，且肝性脑病的一年生存率低于50%，三年生存率低于25%。其不仅严重影响肝硬化患者的预后，并且给医疗系统带来沉重的负担。输注人血白蛋白可能适用于肝硬化肝性脑病的治疗，既往研究和荟萃分析已经证明了其临床益处。然而，人血白蛋白的成本极大地影响了其在临床实践中的全面应用，临床医师常以相对较小的剂量（10-20g/d）开具人血白蛋白处方。为此，北部战区总医院消化内科牵头开展了一项多中心随机对照试验，探索是否可以通过增加人血白蛋白的输注剂量，进一步改善肝硬化肝性脑病患者的结局。现诚挚邀请消化科、肝病科、和感染科等相关专业医生参与。

项目（四）糖皮质激素治疗急性药物性肝损伤伴高胆红素血症的疗效的多中心随机对照试验研究单位招募

药物性肝损伤是指由药品、中药材、天然药物、保健品、膳食补充剂或其代谢产物、辅料、污染物、杂质等所导致的肝损伤。轻度药物性肝损伤患者可仅表现出非特异性胃肠道症状，而伴有严重高胆红素血症的患者可发展至急性肝衰竭，表现为肝功能明显恶化、黄疸、凝血功能障碍，甚至死亡。糖皮质激素可能是一种治疗的潜在手段，但其疗效及在临床实践指南的推荐价值尚存争议。为此，北部战区总医院消化内科牵头开展了一项多中心随机对照试验，以探讨糖皮质激素治疗急性药物性肝损伤伴高胆红素血症的疗效，有助于为优化药物性肝损伤的治疗方案提供高质。现诚挚邀请消化科、肝病科、和感染科等相关专业医生参与。

若您对以上任一研究项目感兴趣，可与我们联系，以获得更详细的研究信息。

译文作者

孙延召，河北省人民医院老年消化内科，河北北方学院研究生院。

专家简介

白云，河北省人民医院老年消化内科主任医师，河北医科大学、河北北方学院、华北理工大学兼职硕士生导师。省“三三三”三层次人才。任中国医师协会消化医师分会脑肠动力委员会委员，河北省医学会消化病学分会委员及心身学组副组长，河北省医学会消化内镜分会委员，河北省肝病学会肝硬化及肝纤维化专委会委员等。从事肝硬化门脉高压临床及内镜诊治、消化道肿瘤发病机制研究。主持政府资助优秀人才项目1项，省卫健委立项1项，获省科技进步三等奖1项，省医学科技一等奖3项，发表SCI论文9篇，中文期刊论文30余篇，著作3部。