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产品名称:1620475-28-6,AF647 NHS ester的表征手段与质量控制
一、核心结构与功能特性
结构基础:AF647荧光基团(近红外染料,激发峰647-650nm,发射峰668-670nm)与N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS ester)活性基团偶联。NHS酯可与生物分子(如蛋白质、抗体、核酸)的氨基(-NH₂)发生特异性共价反应,形成稳定酰胺键,实现荧光标记。
功能优势:近红外荧光(穿透性强、生物背景干扰低)、高量子产率(0.33-0.45)、良好光稳定性(抗光漂白)、水溶性及生物相容性。
二、表征手段
结构确认:
核磁共振(NMR):¹H NMR/¹³C NMR分析AF647的苯环、醚键及NHS酯的化学位移,确认连接位点。
质谱(MS):MALDI-TOF或ESI-MS测定分子量(理论分子量约939g/mol),验证纯度(≥95%)。
红外光谱(FTIR):检测NHS酯的C=O伸缩振动(1700-1750cm⁻¹)、AF647的芳香环特征峰,确认官能团存在。
光学性质测试:
紫外-可见光谱(UV-Vis):测定最大吸收波长(647-650nm),验证消光系数(高消光系数提升荧光亮度)。
荧光光谱:确认发射波长(668-670nm)、量子产率(0.33-0.45)及光稳定性(抗光漂白能力)。
荧光寿命与偏振:评估荧光稳定性及分子环境敏感性。
纯度与杂质分析:
高效液相色谱(HPLC):检测主峰纯度(≥95%),分离游离染料、水解产物及小分子杂质。
薄层色谱(TLC):快速验证纯度及杂质分布。
凝胶渗透色谱(GPC):测定分子量分布及多分散指数(PDI)。
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