Olink蛋白质组学技术：高灵敏度检测新维度与多领域应用解析

一、技术背景与发展现状

随着精准医学与转化医学的快速发展，蛋白质组学在生命科学研究中的重要性日益凸显。传统蛋白质检测方法如ELISA和Western Blot在检测通量、灵敏度和临床转化能力方面存在诸多局限。Olink蛋白质组学技术通过其创新的邻近延伸分析技术，实现了fg/mL级别的检测灵敏度、高达3072种蛋白的多重检测能力，以及优异的样本兼容性，成为当前蛋白质组学研究的重要工具。

二、核心技术原理与创新突破

PEA技术机制
邻近延伸分析技术是Olink平台的核心技术基础，其工作机制包含三个关键步骤：

特异性抗体探针结合：每对靶向特定蛋白的抗体分别标记独特的DNA寡核苷酸探针

空间邻近延伸：当抗体对结合目标蛋白后，DNA探针在空间上接近并通过互补配对，在DNA聚合酶作用下延伸形成特异性双链DNA模板

高灵敏度检测：通过qPCR或NGS技术对DNA模板进行定量分析，信号强度与原始蛋白浓度呈正相关

技术优势特征

卓越的检测灵敏度：可检测低至0.1 pg/mL的蛋白浓度，如IL-6、TNF-α等低丰度细胞因子

广泛的多重检测能力：单次实验可检测92-3072种蛋白，覆盖炎症、免疫、代谢等多条生物通路

极低的样本需求：仅需1μL样本即可完成92种蛋白分析，特别适用于珍贵临床样本

宽广的动态范围：覆盖10个数量级的浓度范围，可同时检测高丰度和痕量蛋白

三、标准化实验流程与质控体系

样本制备与预处理

• 血浆/血清样本：使用EDTA或肝素抗凝管采集，离心后-80℃保存
• 脑脊液样本：腰椎穿刺采集后离心去除细胞碎片，等体积分装避免反复冻融
• 组织裂解液：RIPA裂解液匀浆处理，BCA法测定蛋白浓度

实验操作流程

1. 抗体探针孵育：样本与抗体探针4℃过夜孵育，确保充分结合
2. DNA延伸与预扩增：加入DNA聚合酶延伸形成双链模板，进行有限循环预扩增
3. 信号检测与分析：基于qPCR或NGS平台检测，计算归一化蛋白表达量

质量控制要点

样本随机化排布消除板间差异

设置内参对照确保数据可靠性

建立标准化的数据校正流程

四、应用场景与典型案例

疾病机制研究
在MPS III B型溶酶体贮积症小鼠模型中，通过Olink技术检测脑脊液与血清蛋白差异，成功鉴定CCL3、IL-1α等关键炎症因子，为靶向治疗策略提供了分子依据。

临床诊断与分型

• 神经退行性疾病：研究团队利用Olink技术发现21种阿尔茨海默病血液标志物，构建了诊断效能优异的预测模型
• 脓毒症精准分型：通过蛋白标志物筛选实现了脓毒症亚型区分，为指导临床治疗提供了新思路

药物研发应用

免疫治疗研究：发现血浆LIF水平与PD-1抑制剂耐药性相关，为联合治疗策略提供了理论支持

靶点验证：证实TNFSF14通过激活IL-1β/IL-6通路放大炎症反应，成为潜在治疗靶点

五、多组学整合与前沿展望

多组学整合策略

1. 转录组-蛋白组联合分析：在特应性皮炎研究中，结合单细胞转录组与Olink蛋白组数据，系统解析了Th2细胞主导的炎症微环境特征
2. 代谢组-蛋白组交叉验证：通过代谢组学与蛋白质组学数据整合，揭示了铁代谢调控在非酒精性脂肪肝发病中的关键作用
3. 空间多组学应用：结合空间转录组与蛋白组数据，实现了脑疾病中神经炎症区域的精确定位

技术发展前景
Olink蛋白质组学技术以其卓越的技术性能，正在重塑生命科学研究范式。随着技术迭代和成本优化，该技术将在基础研究、临床诊断和药物开发等领域发挥更加重要的作用，为精准医疗提供强有力的技术支撑。

Olink蛋白组学检测服务哪里有？

乐备实（LabEx）Olink 蛋白组学检测服务基于独有的邻位延伸分析技术（PEA），核心优势体现在高特异性、高灵敏度与超高通量，可满足从基础科研到药物研发全阶段的检测需求。其支持 1-8μL 微量样本检测，适配 20 + 类样本类型，单次可检测 21-3072 种蛋白，且数据符合 FDA 监管要求，学术认可度高，能为精准医学、药物研发及健康管理等领域提供高效、可靠的多蛋白同步检测解决方案。

乐备实是国内专注于提供高质量蛋白检测以及组学分析服务的实验服务专家，自2018年成立以来，乐备实不断寻求突破，公司的服务技术平台已扩展到单细胞测序、空间多组学、流式检测、超敏电化学发光、Luminex多因子检测、抗体芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫组化、DSP空间多组学等30多个，建立起了一套涵盖基因、蛋白、细胞以及组织水平实验的完整检测体系。

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