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产品名称:APC链霉亲和素,APC Streptavidin的核心优势与实验特性
1. 核心优势与实验特性
高灵敏度与低背景:APC荧光信号强,信噪比高;链霉亲和素-生物素系统通过信号放大(如生物素化抗体+APC-Streptavidin)提升检测灵敏度,适配低丰度靶标(如肿瘤标志物、细胞表面受体)。
多色兼容性:APC发射波长在红色光谱区,与FITC(绿)、PE(橙)等荧光染料无显著光谱重叠,支持四色及以上流式细胞术,适配复杂细胞亚群分析(如免疫细胞CD4/CD8/PD-1联检)。
稳定性与操作友好性:链霉亲和素耐酸碱(pH 2-13)、高温(70-80℃)及有机溶剂,APC在弱碱性缓冲液(pH 8.0-9.0)中稳定;试剂-20℃避光保存,分装避免反复冻融,工作液浓度通常0.5-10 μg/mL(需实验优化)。
生物正交性:适配免疫组化、ELISA、Western blot、荧光原位杂交(FISH)及磁珠分离技术,支持蛋白质/核酸检测、细胞标记及药物递送研究。
2. 核心应用场景
流式细胞术:标记生物素化抗体(如抗CD分子、细胞因子),检测细胞表面/内部抗原(如T细胞亚群、肿瘤细胞PD-L1表达),结合多色通道实现多维数据分析。
免疫检测与成像:在ELISA、免疫荧光、Western blot中作为信号放大工具;用于组织切片免疫组化,定位靶蛋白(如磷酸化蛋白、神经递质受体)。
分子互作研究:通过生物素化探针(如DNA/RNA)捕获相互作用蛋白(如免疫沉淀、RNA pull-down),或利用链霉亲和素磁珠富集生物素化配体(如抗体、核酸)。
药物递送与靶向治疗:偶联生物素化纳米载体(如脂质体、金纳米颗粒),实现肿瘤特异性成像与药物递送(如化疗药物MMAE),或开发链霉亲和素疫苗激活免疫应答。
3. 实验操作要点
样本处理:生物素化抗体/探针与样本孵育后,加入APC-Streptavidin避光反应30-45分钟,洗涤去除未结合复合物(含0.1% Tween-20的PBS)。
检测条件:流式细胞仪需配备红色激光(633/647 nm)及对应滤光片;共聚焦显微镜适配660-670 nm发射通道,避免自发荧光干扰。
对照设置:阴性对照(未标记生物素)、竞争抑制对照(过量游离生物素)及封闭液(1% BSA-PBS)减少非特异性结合。
注意事项:操作需避光防止荧光淬灭;叠氮钠等防腐剂需安全处理;内源性生物素需通过封闭(如高温处理)降低背景。
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