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师弟
我的小论文搞砸了,没有一个高级实验、创新性一般,蛋白丰度低、WB 条带也浅得很,估计上不了三分。
先别泄气呀,你发群里的文章我看了,还有可以补救的地方。
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师姐
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师弟
补实验吗?
你让 WB 条带发光一下试试!这样数据会更有说服力,从而可能提升论文的 IF。点击申请福利试用~
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师姐
荧光 WB 与普通 WB 到底有什么区别?
荧光 Western Blot(Fluorescence Western Blot)和传统化学发光 Western Blot(Chemiluminescence Western Blot)之间的主要区别在于灵敏度、动态范围、背景噪音、多重检测能力和定量分析等方面。
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总的来说,荧光 Western Blot 在多重性、动态范围、定量准确性等方面具有优势。而普通的发光 Western Blot 操作简便,虽成本较低,但可能在多重检测及定量准确度方面不如荧光 Western Blot。
如何把荧光 WB 融进课题?
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师弟
看起来有救了,但是我们要如何把这个技术融进课题?
我们可以从文献入手,看看其他研究者是如何使用荧光 Western Blot 的。这样不仅能帮助我们更好地理解这项技术,还能为我们的课题提供有力的支持。我们一起看看这篇文章。
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师姐
最近,一项发表在
Cell期刊研究 [1] ,通过小鼠模型和人类样本,深入探讨了粪菌移植(Fecal Microbiota Transplant,FMT)对肠道微生物群落的影响,可能改变肠道区域生态系统的本质和特性。该研究采用 荧光 Western Blot 技术 对小鼠的空肠和结肠组织进行了 GATA4 和 SATB2 蛋白量化分析,结果表明 FMT 增强了结肠特性调节因子 SATB2 的表达。 该技术能够准确反映蛋白质在不同条件下的表达变化,为研究提供了可靠的数据支持。
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荧光 Western Blot 分析技术在这一实验中起到了关键作用:
精确检测与量化:荧光 WB 技术通过其高灵敏度,能够精确地检测和量化低丰度蛋白,如 GATA4 和 SATB2,确保了研究数据的可靠性和精确性,为理解微生物移植对肠道组织的影响提供了坚实的数据基础。
宽动态范围的多重检测:该技术具有宽广的动态范围,允许在同一实验中同时检测高丰度和低丰度蛋白,使得研究人员能够在同一张膜上进行多重蛋白检测,从而提高了实验的效率和数据的丰富性,为全面分析微生物移植的影响提供了可能。
非侵入性分析保护蛋白质完整性:荧光 WB 技术无需使用染色试剂,减少了对蛋白质结构和功能的潜在影响,从而保护了蛋白质的完整性。
ChemiDoc MP 系统:助力每一次 WB 实验
为了更好地实现荧光 WB 的优势,选择合适的成像系统至关重要。Bio-Rad 的 ChemiDoc MP 系统是一款专为荧光 WB 设计的多功能成像系统,具备以下特点:
高灵敏度成像:ChemiDoc MP 系统采用了先进的 CCD 摄像头和光学系统,能够检测到极低水平的荧光信号。其高灵敏度使得即使在低蛋白表达水平的情况下,也能清晰地成像。即使面对表达量较低的蛋白,较弱的条带,ChemiDoc MP 系统可以轻松检测到其微小变化。
宽动态范围:ChemiDoc MP 系统的动态范围非常宽,能够同时检测到高丰度和低丰度蛋白的信号。这意味着研究人员可以在同一张膜上进行多重检测,而无需担心信号饱和或丢失。
低背景噪音:ChemiDoc MP 系统通过优化光学设计和软件算法,有效降低了背景噪音。其低背景噪音特性使得图像更加清晰,条带更加明显。再也不怕脏条带了!
Bio-Rad 成像仪现正开放免费试用活动,名额有限。只需扫描下方二维码提交申请,即有机会获取亲身体验新设备的机会。
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ChemiDoc Go 荧光及化学发光成像系统
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师弟
看来 ChemiDoc MP 系统不仅提升了实验的效率和准确性,还能为研究人员提供了一个强大的工具,以获得更高质量的 Western Blot 结果。
没错,快拿上这篇论文找导师「沟通」一下吧!
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师姐
注:
1. 相关产品仅限科研使用,不作为临床诊断。
2. Bio-Rad 是 Bio-Rad Laboratories,Inc. 在特定区域的商标。
3. 本活动的最终解释权归伯乐生命医学产品(上海)有限公司。
内容策划:沈佳钰
内容审核:周育红
题图来源:自己做的
参考文献:
[1] Microbiome mismatches from microbiota transplants lead to persistent off-target metabolic and immunomodulatory effects, DeLeon, Orlando et al. Cell, Volume 188, Issue 15, 3927 - 3941.e13
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