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产品名称:DMG-PEG-CY5.5 ,1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-聚乙二醇-CY5.5的合成方法
合成方法
1. 典型合成路线
DMG-PEG合成
步骤:将DMG的sn-3位羟基与羧基-PEG-COOH通过酯化反应连接,形成DMG-PEG-COOH。
条件:
缩合剂:DCC/DMAP或EDC/NHS,在有机溶剂(如二氯甲烷)中反应。
纯化:硅胶柱层析或透析去除未反应杂质。
CY5.5修饰
方法1:将DMG-PEG-COOH与CY5.5-NH₂通过酰胺键反应,生成DMG-PEG-CY5.5。
方法2:通过点击化学(如CuAAC)将叠氮化修饰的CY5.5与炔基化DMG-PEG连接,提高反应效率。
纯化:透析或凝胶过滤色谱去除未反应染料。
2. 关键参数
PEG分子量:2000 Da是平衡循环时间和荧光信号强度的常用选择。
反应条件:
pH:酰胺键形成需pH 7-8,避免CY5.5开环降解。
温度:通常在室温至40°C下反应,避免DMG氧化。
催化剂:可添加少量有机碱(如三乙胺)促进反应。
染料标记率:通过紫外-可见光谱测定CY5.5的吸光度(ε₆₇₅≈250,000 M⁻¹cm⁻¹),计算标记效率(通常>90%)。
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