品名:Annexin V-mFluor Blue 570 Conjugate(Annexin V-mFluor 570蓝色激发标记)
用途:科研
一、基本描述
Annexin V-mFluor Blue 570 Conjugate 是一种基于 Annexin V 与 mFluor Blue 570 染料偶联而成的凋亡检测探针,专用于识别早期凋亡细胞外翻的磷脂酰丝氨酸(PS)。该探针采用405 nm激光激发,发射波长在570 nm左右,适合在多色流式细胞术或荧光成像实验中与FITC、PE、APC等染料配对使用。其低背景、高荧光强度和优良的结合亲和性,使其成为检测细胞早期凋亡的敏感而可靠的工具。
二、化学性质
mFluor Blue 570 是一种蓝光激发、橙红色发射的荧光染料,具有出色的光稳定性和良好的水溶性。其激发波长约为405 nm,发射波长约为570 nm,量子产率高,适合多重荧光分析平台。Annexin V 蛋白能以钙离子依赖性方式高选择性识别PS,通过偶联技术与染料共价连接,不影响其生物学结合能力。整个复合物在pH 7.4的缓冲条件下较为稳定,在实验条件下可长期保持荧光活性与结合功能。
三、制备方法
该探针的制备过程包括:
(1)将Annexin V与mFluor Blue 570 NHS酯在碱性缓冲液(如pH 8.3的PBS)中反应,偶联至蛋白的赖氨酸残基;
(2)反应后使用凝胶层析或分子截留进行纯化,去除未偶联的染料分子;
(3)通过BCA测定蛋白浓度和Amax法确定标记度。
整个过程控制pH和温度,确保染料与蛋白功能不被破坏。
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