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浙江大学果实品质生物学团队揭示m6A结合蛋白SlYTH1调控果实芳香物质合成的分子机制

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N6-甲基腺苷(m6A)是真核生物中最普遍的RNA表观遗传修饰,由甲基转移酶(writers)催化,去甲基化酶(erasers)去除,并被结合蛋白(readers)识别,共同调节RNA的稳定性、剪接、翻译和降解等生命过程。尽管先前研究已确立了m6A稳态在调控果实成熟中的关键作用,但m6A介导的果实品质性状形成的转录后机制仍未被深入阐明。

近日,浙江大学果实品质生物学团队张波教授研究组在Plant Physiology发表了题为The m6A reader SlYTH1 regulates flavor-related volatiles biosynthesis via affecting mRNA stability and translation in tomato fruit的研究论文,解析了m6A结合蛋白SlYTH1在番茄果实芳香物质生物合成中的功能及其调控机制。不同于该研究组先前报道负调控果实芳香物质积累的SlYTH2(PNAS, 2024, doi: 10.1073/pnas.2405100121),本研究发现SlYTH1是果实芳香物质合成的正调控因子,体现了家族成员功能的差异性;同时,两者发挥调控作用的分子机制也有所不同。

番茄中含有9个YTH家族(含有YT521B同源域)基因,其中,SlYTH1基因表达量明显高于其他8个成员,尤其在果实成熟过程中大量表达,并且呈现先升高后下降的趋势,在果实破色期(Breaker,Br)达到峰值(图1A, B)。利用CRISPR/Cas9技术敲除SlYTH1基因,发现slyth1突变体并未影响果实的乙烯释放量、色泽及硬度(图1C-I)。同时,敲除SlYTH1不影响番茄果实风味相关的果糖、葡萄糖、柠檬酸和苹果酸含量,但是显著降低消费者喜爱的芳香物质含量,特别是番茄风味增强剂IBT(2-异丁基噻唑,2-isobutylthiazole)在slyth1突变体果实中的含量比野生型减少了约 75%和 57%。

图1. SlYTH1不影响番茄果实正常成熟

在分子机制上,SlYTH1在番茄体外和体内都能结合m6A修饰的mRNA靶标,发挥维持mRNA稳定性和促进翻译的双重作用。具体来说,SlYTH1功能丧失导致IBT生物合成过程中两个关键靶标基因SlBCAT1和SlTNH1的转录和蛋白水平的降低(图2)。

图2. SlYTH1调控番茄果实芳香物质合成的作用模型

结合小组之前的发现,研究认为SlYTH1和SlYTH2对芳香物质的调控效果、识别靶基因和作用机制方面均存在不同。SlYTH1通过增强其目标mRNA(即SlBCAT1和SlTNH1)的稳定性和翻译,促进芳香物质合成,特别是来自氨基酸途径的IBT;SlYTH2通过液-液相分离(LLPS),形成RNA-蛋白质凝聚物,抑制脂肪酸和类胡萝卜素途径芳香物质合成关键基因SlHPL和SlCCD1B的翻译,从而减少物质含量。SlYTH1表达随着果实成熟增加,SlYTH2则在果实绿熟后表达下降,两者协同调控果实成熟过程的芳香物质积累和风味品质形成。

浙江大学高颖博士(现重庆大学副教授)、浙江大学博士研究生卞寒晓为论文共同第一作者。浙江大学高颖博士和张波教授为论文共同通讯作者。西南大学潘宇教授、浙江省农业科学院邓志平研究员、重庆大学李正国教授、浙江大学陈昆松教授为研究提供了帮助。研究工作得到了国家自然科学基金、浙江省自然科学基金、中国博士后科学基金项目资助。

论文链接:

https://doi.org/10.1093/plphys/kiaf245

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