梅毒振荡器 数显水平旋转仪知识
荧光螺旋体抗体吸附试验(FTA - ABS)介绍
定义与方法
荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA - ABS)是一种间接荧光抗体法,也是梅毒螺旋体抗原血清学试验的“金标准”。试验前先用Reiter密螺旋体超声波裂解物处理病人血清,除去其中具有交叉反应的抗体后,再与梅毒螺旋体作用,然后加用荧光素标记的抗人IgG。
检查作用
- 检测抗体:能最早检测出梅毒螺旋体的特异性抗体。
- 疾病诊断:可证明患者当前或既往的梅毒螺旋体感染;当临床高度怀疑梅毒患者、而非密螺旋体抗原血清试验无反应时,也可直接用本试验予以确诊;可用于反应性非梅毒螺旋体试验的随访,并作为疑似梅毒晚期患者的单项试验;可用于解决检验结果与临床印象之间存在的差异;可为脑脊液性病研究实验室(VDRL - CSF)试验结果反应时提供神经梅毒的附加证据。
检查过程
- 血清处理:用吸收剂对经56℃水浴30min灭活的被检血清作1∶5稀释,充分混匀。
- 设置对照
- 加0.03ml分别用PBS和吸收剂作1∶5稀释过的非特异性控制血清于固着抗原螺旋体的玻片反应圈内,此为阴性对照。
- 加0.03ml经吸收剂作1∶5稀释过的最小反应性(+)控制血清于玻片反应圈内,此为阳性对照。
- 加样反应:加0.03ml经吸收剂作1∶5稀释过的被检血清于玻片反应圈内,将此玻片置于湿盒内,36℃±1℃,保温30min。
- 清洗玻片:将玻片置于玻片架上,用PBS(pH值7.2±0.1)冲淋玻片5s,然后浸入此PBS中5min;再用已经120℃15min消毒的蒸馏水冲淋5min,用吸水纸轻轻将玻片吸干。
- 荧光标记:加0.03ml异硫氰酸荧光素标记的抗人IgG(FITC - 标记抗人IgG)于每个反应圈内,重复清洗玻片的步骤。
- 制片观察:加固定液1小滴于玻片上,再复上盖玻片,切勿形成气泡;将玻片置荧光显微镜下,先用钨灯为光源,在暗视野下寻找Nichols螺旋体。
结果判定
阳性结果参照阳性标准血清的荧光强度判定:半数高倍视野(10条左右)出现荧光,则为(++),多半视野呈荧光(15条左右)则为(+++),全部(约20条)出现强荧光则为(++++)。可疑结果参照非特异性血清的荧光强度判定为(++)或(+),阴性结果参照阴性对照血清判定为(-)或(。
临床意义
- 阳性:见于梅毒性心血管病、密螺旋体感染。
- 异常结果:本试验敏感性和特异性均高,但操作复杂,临床上少用,仅用于疑难病人的诊断和研究工作。
注意事项
检查前
该试验特异性强,敏感性高,一般用来作证实试验,不能作为疗效观察和随访指征。若需判定疗效,可参考血清反应素试验结果。
检查时
- 抽血检查时,若出现晕针症状如头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水,待症状缓解。
- 由于取材不当或用药治疗后都可影响检查结果,需慎重。
不适宜人群
未检出梅毒抗体患者,未感染梅毒,除非有其他证据证明感染的存在。
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