外泌体得率不高、纯度不够，这些问题它来解决（免费试用）

说起生物实验，还真是有点玄学在身：实验数据好不好，细胞说了算！

刚来的师妹 Follow 顶刊的外泌体相关细胞实验，不是提取的外泌体得率不高，就是纯度不够。苦干半个月，颗粒无收。原因出在哪？大师兄一语道破：「细胞养对了吗？提纯方法合适吗？」

想要从细胞上清中提取外泌体，养好细胞是获取高质量外泌体的重要因素。不同细胞类型对培养基、血清的要求千差万别，比如肿瘤细胞和间充质干细胞选择外泌体专用无血清培养基；难养的原代细胞，也有专用血清。此外，除了从细胞中提取外泌体，组织/血样/尿液等样本也是外泌体常见来源，不同的样本类型对应最佳的提纯方法。

为了更好地服务大家开展外泌体研究，Umibio 提供多种专用型培养基和血清可供选择，如外泌体专用的无血清培养基（化学成分限定无动物源），去外泌体血清等。此外，Umibio 外泌体提取试剂盒将预处理和提取纯化相结合，涵盖各类型样本，做差异化配方，最大程度帮助老师们解决外泌体提取的困扰。现点击下方图片，即可免费申请试用，轻松搞定外泌体提取纯化。

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Umibio 外泌体提取试剂盒的优势：

客户享受一对一技术全程指导服务，包教包会；

试剂盒对于设备需求简单，基本所有实验室都会有高速离心机，摆脱超离；

样品处理量大，可达同类产品 5 倍以上；新鲜样本可尽快提取完成，不用送出去做技术服务；

解决样本运输反复冻融外泌体量有所降低，自己做解冻次数少；

目前使用 Umibio 外泌体提取试剂盒发表的文献已有 300+ 篇，实验数据值得信赖。

外泌体常见问题及注意事项：

1、培养细胞时，如何去除血清来源的外泌体？

多数情况下，细胞在体外培养时需要无外泌体血清，但市场鱼目混珠，工艺简陋，「假」血清层出不穷，为避免血清对细胞外泌体的污染，可采用以下几种方法：

选择正规厂家产品，保证产品工艺；

选择无血清完全替代培养基进行细胞培养；

将细胞培养用的血清通过 1 × 105 g 超速离心 10 h 以上以去除血清外泌体；

2、细胞培养过程中的死细胞是否会影响外泌体的提取？

会的。在收获细胞时，应确定死亡细胞占比不超过 5%。细胞凋亡/死亡过程中会释放大量囊泡，它们在外泌体的提取纯化过程中会污染活细胞产生的外泌体，同时有可能会堵塞 EPF 纯化柱。

3、在纯化过程中，EPF 柱为什么会出现堵塞现象？

该现象有可能是因为细胞培养时间过长产生很多细胞碎片(样品离心预处理时不充分，仍有杂质残留。若杂质残留较多，请将上清液转移至新离心管，10,000 g/20 min 离心 2～3 次至无明显沉淀，每次离心收集上清液，建议细胞培养 24～48 h 左右收集上清液。

PBS 重悬的外泌体初始液 12,000 g /2 min 离心 2～3 次至无明显沉淀，每次离心收集上清液，上清液再进行 EPF 柱纯化。

4、取材越新鲜越好，组织样本建议 3 个月内为宜，样品请冻存于 -80°。对于血样、尿样和体液等，冻存前需离心去除细胞和血小板，分装冻存于 -80°。

5、提取后的外泌体可以分装冻存-80°，避免反复冻融。对于一些功能性实验，建议新鲜提取。

6、外泌体的鉴定方法包括：通常使用透射电镜法、Western blot 检测分子标志物、纳米颗粒示踪法以及亲脂染料分析等方法鉴定提取的外泌体。在进行 Western Blot 检测时，通常检测外泌体标志蛋白（CD63、CD9、CD81、TSG101 等）。

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内容策划：邹礼平
内容审核：吴军

题图来源：自己做的