“痣不在此”—非手术疗法可消除先天性巨大痣并阻止黑色素瘤形成

撰文 | Qi

先天性黑色素细胞痣（congenital melanocytic nevi,CMN）是出生时存在的黑色素细胞的良性增殖，每20000例新生儿中约有1例会出现大或巨大的先天性痣，这些良性痣中约有2%和12%会转化为黑色素瘤。除此之外，还会导致严重的美容焦虑和社会心理问题。NRAS激活突变是在高达80%–95%的大型和巨大先天性痣中发现的唯一复发性体细胞突变，大多数为Q61K或Q61R，导致组成型活性NRAS蛋白【1-3】。尽管可以通过手术切除、色素特异性激光等方法治疗，但仍需替代疗法来避免当前疗法的缺点，比如疤痕，同时也最大限度地减少黑色素瘤的终生风险。

2022年5月12日，来自哈佛医学院的David E. Fisher团队在Cell杂志上发表了一篇题为Topical therapy for regression and melanoma prevention of congenital giant nevi的文章，这项工作证明MEK、PI3K 和c-KIT抑制剂或SADBE对人类巨大先天性痣的临床前模型的治疗能力，尤其是SADBE能够触发先天免疫募集巨噬细胞清除痣，并能完全预防小鼠黑色素瘤。总之，这些发现抓住了巨大先天性痣的机制漏洞，并提出了局部干预的机会，可能会为患者提供更多的治疗选择。

研究人员首先生成并表征了组成型和诱导型小鼠CMN模型（Dct-Cre NrasQ61R和Tyr-CreERT2 NrasQ61R小鼠），并与人类病变特征进行比较，两种小鼠均显示出显著的黑色素瘤形成率。由于人类病例中多为NRAS杂合突变，他们同样也观察到两种NrasQ61R/+小鼠黑色素瘤形成的显着潜伏期和零星频率。免疫荧光结果显示，Dct-Cre NrasQ61R痣衍生的黑色素瘤中MEK/ERK信号传导显著激活，RNA-seq显示小鼠CMN模型中调节性T细胞特异性因子Foxp3和淋巴特异性转录因子Spi-b的上调，提示痣中的免疫浸润。总之，人类CMN样本和小鼠CMN表现出许多重叠的途径，因此可用于痣消退和黑色素瘤预防的治疗策略的临床前评估。

基于上述发现，他们假设MAPK或PI3K通路抑制剂（单独或联合使用）可能导致NrasQ61R突变驱动的CMN消退。结果显示，局部注射给药可以显著降低痣细胞和色素沉着。研究表明c-KIT抑制剂伊马替尼对人类黑色素细胞具有抑制作用【4】，如果与MEK抑制剂组合使用可以引起进一步的黑素细胞消退，且能诱导免疫反应。此外，SADBE被认为可以诱发色素减退或白癜风【5】，在小鼠出生后一周施以SADBE可以引起明显的痣消退和药物处理区的白色毛发生长。

为了评估SADBE依赖性痣消退的免疫细胞需求，研究人员通过针对不同免疫谱系的单抗注射，从而对Dct-Cre NrasQ61R小鼠进行特定免疫群体进行消耗。与对照组相比，消耗巨噬细胞能显著抑制SADBE清除黑色素A（melan-A）阳性细胞的能力，而对CD4+T细胞、NK细胞、CD8+T细胞和CD19+B细胞的消耗并不影响SADBE的功效。表达促炎巨噬细胞标记iNOS的细胞也被SADBE强烈募集。对用SADBE处理的Dct-Cre NrasQ61R小鼠和对照小鼠进行RNA-seq显示，上调最明显的基因是巨噬细胞相关的细胞因子，而最明显的通路是NFκB介导的 TNFα信号传导通路。

接下来，研究人员将人类的切除CMN组织移植到免疫缺陷SHO小鼠（缺乏适应性免疫但保留巨噬细胞功能）中。在SADBE治疗后，人类巨大痣异种移植物中的黑色素细胞显着减少了90%，F4/80+免疫染色及其定量结果显示，小鼠巨噬细胞（F4/80+）显着募集到CMN组织中，这些结果表明SADBE表现出诱导巨噬细胞募集的能力以及小鼠SHO模型中人CMN细胞的显着清除。那么SADBE能否阻止黑色素瘤的形成呢？他们用SADBE治疗了一组29只Dct-Cre NrasQ61R/+ 小鼠的背侧躯干皮肤，并进行了长达400天的观察。在观察期间，用SADBE预处理可完全防止在处理过的皮肤内形成黑色素瘤。重要的是，在SADBE治疗的小鼠中确实形成了六种黑色素瘤，但都位于未经治疗的皮肤区域。

总的来说，这项工作开发了一组用于CMN研究的小鼠模型，并利用它们证实了除传统疗法之外的，在清除痣和防止黑色素瘤形成方面非常有效的非手术治疗策略。

https://doi.org/10.1016/j.cell.2022.04.025

制版人：十一

参考文献

1. Bauer, J., Curtin, J.A., Pinkel, D., and Bastian, B.C. (2007). Congenital melanocytic nevi frequently harbor NRAS mutations but no BRAF mutations.J. Invest. Dermatol.127, 179–182.

2. Charbel, C., Fontaine, R.H., Malouf, G.G., Picard, A., Kadlub, N., El-Murr, N., How-Kit, A., Su, X., Coulomb-L’Hermine, A., Tost, J., et al. (2014). NRAS mutation is the sole recurrent somatic mutation in large congenital melanocytic nevi.J. Invest. Dermatol.134, 1067–1074.

3. Kinsler, V.A., Birley, J., and Atherton, D.J. (2009). Great Ormond Street Hospital for Children Registry for congenital melanocytic naevi: prospective study 1988-2007. Part 1-epidemiology, phenotype and outcomes.Br. J. Dermatol.160, 143–150.

4. Cerchione, C., Fabbricini, R., Pane, F., and Luciano, L. (2009). Vitiligo-like lesions in an adult patient treated with imatinib mesylate.Leuk. Res.33, e104– e105.

5. Sakai, K., Fukushima, S., Mizuhashi, S., Jinnin, M., Makino, T., Inoue, Y., and Ihn, H. (2020). Effect of topical immunotherapy with squaric acid dibutylester for alopecia areata in Japanese patients.Allergol. Int.69, 274–278.

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