疾病防治 | 一例散养蛋鸡发生马立克氏病的诊断与思考

摘要：针对本地某鸡场蛋鸡出现发病和死亡情况，通过听取养殖人员的描述，对临床症状和病理变化的观察，并进行实验室方法诊断，最终确定为马立克氏病。经过综合防控措施，最终控制住疫情发展和蔓延。

关键词：蛋鸡；马立克氏病；疫苗

2019年9月太原市某养鸡场散养蛋鸡发生疑似马立克氏病，养殖场主带2只发病鸡和2只病死鸡来山西农业大学动物医 学学院预防兽医学研究室进行诊断和咨询。 通过临床诊断、病理变化观察，结合实验室诊断，最终确诊为马立克氏病。 以下为具体情况：

1 发病情况

鸡场所养鸡为蛋鸡，鸡群分两批日龄，一批为73日龄，另一批为187日龄，两批鸡的场地之间有网相隔，均采用散养的养殖方式。近期不断有187日龄的产蛋鸡出现零星死亡，死亡数量也越来越多。而后73日龄的鸡也开始出现零星死亡。对发病鸡采取群体喂药的方式进行治疗，均没有明显效果。使用的药物有清瘟败毒散、黄芪多糖、青霉素、强力霉素等。

2 临床症状

病鸡最初表现为精神萎靡，垂头闭眼，类似打盹；双翅下垂；对刺激反应迟钝；食欲下降，有的病鸡完全废绝；常可见在角落里蹲卧。病鸡拉黄绿色或灰白色稀便。产蛋量下降，有的鸡停止产蛋。发病严重的病鸡会出现神经症状，如头颈扭转，劈叉、站立不稳，转圈等。出现神经症状的病鸡很快就会死亡。

3 病理变化

对病鸡进行剖检，可见肝脏肿大，肝脏上密布白色的结节，结节大小不等。脾脏肿大，表面长有结节，严重时结节长满，看不出原来脾脏的外观和颜色，几乎成为白色（如图1）。腺胃乳头有少量出血点，腺胃和肌胃的交界处发红。肠道内有点状出血。双侧盲肠扁桃体出血。

4 诊断

由于马立克氏病的经典诊断方法为琼脂扩散试验，由此，本次实验室诊断采用琼脂扩散试验，方法参照万晓星等的方法。将病鸡富含羽髓的羽根剪下后放置于灭菌的试管内，往其中加入2滴PBS后用玻璃棒挤压羽根，当试管中的液体变的浑浊后，将羽根去除，试管中的溶液为羽囊浸液。而后制备厚度约为2～3mm的琼脂板，参照银梅等的方法，将含有氯化钠的PBS配置成为琼脂溶液。其中氯化钠为80g/L，PBS为0.01mol/L，配制后的琼脂为10g/L。将琼脂加热融化后应用脱脂棉过滤，将滤液倒入平皿中备用。将冷却后的琼脂在室温下打孔，剔除孔内琼脂，将琼脂板置于火焰上加热，将孔周围琼脂熔化来封底。而后用移液器向中央孔中滴入MD阳性血清，周围孔中选中其中1孔滴加阳性抗原，其余孔内均滴加羽囊浸液。给孔内滴加液体时，以液面不溢出为正好。滴完液体后盖上平皿盖，将琼脂平板放入一湿盘中，置于37℃温箱中孵育24～72h，每24h需要取出观察，并严格记录。经过72h的观察，可见在标准阳性血清孔和受检的羽囊浸液的中间出现有比较清晰的沉淀线。表明在羽囊中含有马立克氏病病毒，由此可以确诊本病。

5 防控

针对本次发病，淘汰发病鸡群和疑似鸡群，在距离养殖场较远的位置深埋和无害化处理。未发病鸡群隔离至消毒好的鸡舍内，进行舍内养殖，并每天带鸡消毒。对散养养殖区也要进行严格的消毒，尽量做到不留有死角。群体饮用黄芪多糖、电解多维和青霉素，后未见有新的发病和死亡病例。

6 讨论和思考

发病鸡场所养的散养鸡在1日龄时均已免疫过马立克氏病疫苗，而本次仍然发生马立克氏病怀疑是受到强毒攻击或者免疫失败。孟庆华等也通过报道分析了免疫失败是马立克氏病在免疫后仍然发病的主要原因。尤其是疫苗的使用使得病毒在不断发生变异，在变异过程中毒力越来越强，而且出现了超强毒株。高婷婷等也报道在从未发生过马立克氏病的鸡场出现感染。在2013年Gong等报道了在免疫鸡场发生了马立克氏病超强毒感染，即vvMDV。用CVI988疫苗免疫后对超强毒株的保护力比较低，保护指数仅为66.7。vv/vv+MDV已经在我国开始流行。本次鸡场出现发病，虽然并未进行病毒的分离鉴定，但由于同一批鸡苗，其他养殖场并未发生本病，由此可以推测本例鸡场发病并非免疫失败导致，而是强毒或者超强毒的病毒感染所致，其感染后突破疫苗的免疫保护，引起鸡群发病并出现大批死亡。

鸡场在发生本病后，通常采用的方式是扑杀并进行无害化处理，并对鸡场进行净化。本次发病由于是散养鸡场，鸡的活动范围较大，所以很难能够达到严格的消毒和彻底净化。通过一系列的技术措施，5d后再没有出现新病例，说明达到预期效果。

感染MDV的鸡会引起严重的免疫抑制。MDV感染导致发病鸡的法氏囊和胸腺萎缩，抑制了细胞介导的免疫和体液免疫，这样就容易造成其他病原继发感染。所以在预防本病的同时，要注意防控其他病原感染，导致病情复杂，影响诊断和防控。

参考文献：略

作者：唐娟，刘华栋*，王彩先，李婷婷，陆冰洋，丁树荣/山西农业大学动物医学学院

来源：《中国动物保健》2021年1月刊