三氟乙酸是许多有机化合物的良好溶剂,常用于多肽的合成、纯化过程,特别是在多肽纯化过程中,经常使用三氟乙酸作离子对试剂。三氟乙酸的特点是对蛋白的溶解性好,但是三氟乙酸有中等毒类,对眼睛、皮肤、粘膜和呼吸道有强烈的刺激作用,其对细胞膜表面的蛋白有溶解的性质,是一种潜在基因毒性物质。因此多肽药物中三氟乙酸限量是一项重要的检测指标。
三氟乙酸的酸性强,极性很大,在反相色谱柱中基本无保留;采用气相色谱方法测定,因极性太强无法满足样品对灵敏度的要求。三氟乙酸是一种强酸,容易解离,解离后的三氟乙酸根可以阴离子方式在色谱柱中保留,且与其他杂质分离良好;分离后经抑制电导法检测,定量限可以满足样品中 0.1%的限量要求。
色谱图:
多肽中三氟乙酸的测定色谱图 3-三氟乙酸
结论:采用离子色谱法检测多肽中三氟乙酸的残留,该方法重复性 RSD 小于 2%,回收率在 95%-105%之间,适用于多肽药物中三氟乙酸的质量控制要求,操作简单,稳定性好。
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