猪场及外围洗消采样方法及视频

鼻腔是猪群感染病毒或排毒的主要途径之一，无论在自然感染或者人工造病的条件下，猪群都可以通过鼻腔带毒和排毒。病毒感染的早期诊断对于猪群疫病的控制至关重要，因此开展科学、准确及可执行的监测方案势在必行。

ASF病毒感染途径的研究发现，鼻腔拭子的检测比血液或其他采样方法更早出现，同时也具有易采集、可操作性强、对猪群应激较小等优点，从而成为临床首选。本文参考文献报道结合临床实际情况，对鼻腔拭子采样做一介绍：

第一步

准备鼻拭子采样材料：保存缓冲液、封口胶带、一次性注射器、一次性无菌拭子、记号笔。

第二步

保定猪只，将无菌棉拭子深插入猪只鼻腔内，旋转三次，将拭子放入保存管中，记录猪只信息。

第三步

用无菌注射器注入2ml拭子保存缓冲液，封口，垂直放置，冷藏保存，48h内尽快送检。

鼻拭子采样视频教程：

猪场内环境的样品采集涉及到固体和液体环境，结合生产实际情况，对猪场内环境样本采集做一介绍：

一、固体环境采样教程

步骤一、

准备采样材料：保存缓冲液、封口胶带、一次性注射器、一次性无菌拭子、记号笔。

步骤二、

用无菌注射器向拭管注入2ml保存缓冲液，先浸润无菌棉拭子。

步骤三、

固体环境采样点表面呈井字采样（详见视频），将拭子放入拭管中，记录采样信息；封口，垂直放置，冷藏保存，48h内尽快送检。

二、液体环境采样教程

步骤一、

准备采样材料：无菌离心管、一次性无菌吸头、保存缓冲液、封口胶带、一次性注射器、记号笔。

步骤二、

用无菌注射器向离心管注入4ml保存缓冲液。

步骤三、

用无菌吸头吸取采样点液体1ml置于离心管中（详见视频）。封口，记录采样信息，冷藏保存，48h内尽快送检。

三、猪场内环境建议采样点

猪场内环境涉及的点和面非常多，以下建议采样点涉及的主要是常见污染区域或者需关注的采样点，供养殖场参考。

1、物资消毒间：物资消毒架、物资进口区域门把手、脚踏区域；

2、人员消毒通道：门把手、入口处脚踏区域；

3、兽药房：药房门把手、药房冰箱门把；

4、工作服：刮取污染的工作服上污染物；

5、雨鞋：刮取雨鞋侧面及鞋底的污染物；

6、内部转运车辆：轮胎、货仓、司机室、脚踏、方向盘、油门及刹车部位；

7、内部运输斗车：轮胎、手推把手；

8、饲料加工成品仓出料口：出料口、环境样品、饲料袋；

9、猪场内门把手：猪舍及兽医室等建筑门把手；

10、道路：猪场内道路、猪舍内道路。

以上监测建议频率为一周一次，各养殖场可根据当地疫情压力调整监测频率。

猪场内环境采样

出猪台是猪场与外界车辆直接接触的部位，如果外面售猪车辆洗消不到位，猪场员工装猪时，又没有严格遵循严格的脏净分离原则，直接将场内的猪赶到拉猪车上，就很容易将洗消不彻底的拉猪车上的病毒（包括ASFv、FMDv、PEDv等）带入生产区，从而使猪场染上新的疫病，这也是目前猪场最容易出现问题的环节。据调查了解，ASFv通过离猪场很近的装猪台感染机率有85％的机会。

目前疫情紧张，在猪场外建独立的售猪中转站（或转运中心），来避免ASFv的感染是最实用的办法之一，可以有效的缓冲疫情的威胁。转运中心可以很好避免场内工作人员与外界拉猪车辆接触，人员即使接触也是场内的周转车，而场内的周转车辆是严格按要求做好洗消烘干工作再来装猪的，相对来讲全场的生物安全就有了保障，因此转运中心现在变成了规模猪场的必要设施。

转运中心的建设，是猪场生物安全的重要一部分，而转运中心的环境是否安全关乎猪场疫病是否发生，有案例报道，一养殖场在转运中心监测到相关的病原菌，因洗消工作执行不到位，20天后该病原菌传播到猪场。可见转运中心的洗消工作和环境安全预警的重要性，洗消工作可采用低压冲洗、清洁剂打湿浸泡、热水高压清洗、晾干、消毒、烘干等步骤执行，环境安全预警可定期通过实验室（按照相关部门规定执行）监测环境评估。

转运中心环境监测包括：外部污区、转运灰区及内部净区三个部分，本文结合实际情况，对转运中心环境采样做如下预案：

一、转运中心采样建议

一、采样区域

按划分的三个区域进行采样，包括：外部污区、转运灰区、内部净区。

二、采样示意图

1.外部污区

选择污区的2个区域，如图所示。选择区域1的左上角、右下角采样，选择区域2的左下角、右上角采样。

2. 转运灰区

选择灰区的2个区域，如图所示。选择区域3的左上角、右下角采样，选择区域4的左下角、右上角采样。

3. 内部净区

选择灰区的2个区域，如图所示。选择区域5的左上角、右下角采样，选择区域6的左下角、右上角采样。

二、采样示对象及方法

1.采样对象：

所选采集区域的固体表面、或者环境液体。

2.采样方法：

采用专用动物病毒采样管套装，按净区→灰区→污区顺序采样。

（1）固体表面：使用棉拭子采样，采用“井”字形法采样后放入保存管中。

（2）液体环境：吸取环境中的液体0.5-1ml，放入保存管中。

3.现场监测人员要依照规范进行操作，做好现场记录。

以上监测频率为一周一次，各转运中心可根据当地疫情压力调整监测频率。

转运中心采样视频

在当前非洲猪瘟疫情严峻形势下，猪场需加强生物安全体系建设，切断病原传播链条。运猪车辆在猪场与猪场之间、猪场与屠宰场之间、猪场与饲料厂之间交叉运输的情况很常见，带来病毒交叉传播风险。

对于猪场来说，猪只和饲料的进出都是无法避免的，而负责运输的载体——车辆，是当前交叉污染最突出的问题。被外部污染的车辆与猪场的接触、流通是病毒从猪场外部进入内部的主要途径之一。因此，提高猪场的“运输安全系数”，使用彻底清洗、消毒和烘干的车辆非常重要。

洗消房是洗消中心的第一道防线，车辆经过彻底清洁后，车辆、洗消房内部区域环境及洗消污水的污染与否，直接反映洗消中心的安全系数。同时，当前建立的洗消中心多为区域性共用，洗消中心的安全系数关乎是否造成运输车辆的二次污染，是否增加区域内猪场的安全风险。

洗消房的环境监测涉及到车辆、内部区域环境及污水三个部分，根据文献结合实际情况，对洗消中心-洗消房采样做一建议：

一、车辆采样建议

一、采样清单

二、采样示意图

（1）示意①

（2）示意②

（3）示意③

（4）示意④

二、洗消房-内部区域环境采样建议

一、采样区域选择

原则：所选择的采样区域要具有一定的覆盖面，越大越好。

建议：取前、中、后三个区域，具有覆盖面，并贴合实际。

二、采样示意图

建议选择3个区域进行采样，如图所示，包括：进入洗消间区域A、污水道表面区域B、洗消间区域C。

区域A：选择区域A的左上角、右下角采样。

区域B：选择区域B的左下角、右上角采样。

区域C：选择区域C的左上角、右下角采样。

三、洗消中心污水采样建议

一、采样建议

选择污水道积水区域分3个点（前、中、后）采集积水。

二、采样示意图

以上监测建议频率为一周一次，各洗消中心可根据当地疫情压力调整监测评率。

洗消中心采样建议