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红细胞or真菌,如何不再纠结?

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胡志愿

广东省英德市人民医院

前 言

尿常规是传统的三大常规之一,尿沉渣检查是尿常规重要组成部分,其检查方法也在不断发展,目前尿沉渣定量检测方法主要有三大类:

一是以FAST-READERSY9502双画格细胞计数板为代表的手工定量计数方法为金标准,但速度太慢,不能满足临床需求。

二是以SysmexUF系列全自动尿沉渣分析仪为代表的流式细胞仪检测法。

三是基于摄像后的图像识别技术,如IQ200、DiaSys尿沉渣定量分析工作站、爱威AVE76系列尿液有形成分分析仪等等。

全自动尿液有形成分分析仪操作易于规范化和标准化,且易于质量控制,得到了越来越广泛的应用,但由于尿液的成分复杂,标本中可能含有结晶、小圆上皮细胞、菌尿、混入白带、精液等而使尿液有形成分增多,干扰尿液有形成分分析仪的检测结果,如果不人工复检纠正仪器检测结果,就会误导临床医生,导致误诊。

检验君近段时间就碰到了一例真菌和红细胞混合干扰尿液有形成分分析仪检测结果的例子。


案例经过

患者女,46岁,1天前无明显诱因出现头痛,前额疼痛、胀痛,阵发性,难忍,头晕,天旋地转感,恶心、呕吐胃内容物3次,喷射状,量约200mL,当时未予重视,无缓解,被送往当地卫生院就诊。导尿、吸氧、补液等处理,完善颅脑CT提示“脑出血”。

考虑病情危重,将患者送来我院急诊科就诊,急诊予补液、吸氧等处理,完善血常规、凝血、生化、颅脑CT等检查后,为进一步诊治,拟“脑出血”收入我院神经外科。

病人入院后完善各项常规检查,其中就包括尿常规。恰巧那天我上的是体液班,起初病人的结果并未引起我的注意,因为仪器未提示审核复检。

不过我养成了对每个阳性标本进行浏览复检的习惯,这是病人尿液有形成分图片中的一幅:

▲图1 尿液中有型成分

由于图片中出现单个、偶见成双排列的圆形或椭圆形有形成分(仪器全部识别为红细胞),为了安全起见,我用光学显微镜进行了复检,发现竟是一例真菌和红细胞混合的样本,病人除了有少量红细胞和白细胞之外,其它都是酵母样真菌,如下图:

▲图2 光学显微镜下视野

最后,结合显微镜镜检结果,纠正了尿液有形成分分析仪检查结果,最终结果报告如下图:

▲图3 尿液有形成分分析仪检查结果

案例分析

我科使用的是爱威AVE766+752全自动尿液分析系统,其中AVE766尿液有形成分分析仪是利用机器视觉技术,以自动形态学方法对尿中有形成分进行自动识别与分类计数。

其原理是低倍镜对样本进行全景扫描过筛,阴性标本直接报告;阳性标本,低倍镜下采集管型、上皮细胞等大目标特征参数,进行识别和分类计数,并对细胞、结晶等小目标进行定位,转高倍镜后追踪到目标后采集目标细微特征参数,进行识别和分类计数。

由于该病人尿液中的真菌圆形或椭圆形,直径3~6微米,有折光性,大部分散在分布,与红细胞形态极为相似,因此很容易被仪器识别为红细胞,特别是基于摄像后的图像识别技术的尿沉渣分析仪。

该病人尿干化检查结果潜血阳性(3+),与尿液有形成分结查结果红细胞数量一致,因此仪器未提示复检,假如没有人工复检纠正的话,就会误导临床医生,导致误诊。病人尿液呈现白色,如下图,结合尿中真菌的形态,初步考虑该类真菌为白假丝酵母菌。

▲图4 病人尿液颜色

白假丝酵母菌,亦称为白色念珠菌,是一种真菌,通常存在于正常人口腔、上呼吸道、肠道及阴道,一般在正常机体中数量少,不引起疾病,为条件致病性真菌,当机体免疫功能下降或菌群失调,则本菌大量繁殖并改变生长形式(芽生菌丝相)侵入细胞引起疾病。

既然尿液中的红细胞与酵母样真菌形态很相似,那么怎么鉴别呢?检验君根据多年的经验并结合实验室自身的条件,总结出了以下几种方法:

1

首先是光学显微镜或相差显微镜镜下形态鉴别:尿液中正常红细胞呈现圆盘状,光滑,双面凹陷,有弱的折光性,而酵母样真菌圆形或椭圆形,有时可见串珠状排列或者菌丝,折光性很强,不过有时候肾小球性红细胞(G1、G4)跟酵母样真菌形态上是比较难鉴别的。

2

其次是破碎试验,标本中加入10%KOH或稀乙酸溶液(白细胞计数稀释液),可以完全破碎消失的就是红细胞,而形态完整的则是真菌。

3

最后还可以将尿液低速离心后取沉渣涂片,晾干后用瑞姬氏染液或妇科白带涂片多功能染色液染色后镜检鉴别,当然这种方法比较费时。

总 结

尿液常规检查包括理学检查、化学检查和有形成分检查,检查尿液有形成分对泌尿系统疾病的诊断、鉴别诊断和预后判断有重要意义。

尿液有形成分检查的“金标准”是标准化尿液显微镜检查法,但在实际工作中,却因患者集中检查、样本数量多、临床要求及时发出报告、人员配置不足等原因而满足不了临床需求。

尿液有形成分分析仪具有检验快速、误差小、精密度高、安全等特点,是对尿液有形成分病理改变进行筛选的一个不可多得的仪器,因此在各级医院的使用越来越普遍。

尿液有形成分分析包括有形成分计数和形态学分析两方面,按照检测原理不同尿液有形成分分析仪可以分为三种类型:流式尿液有形成分分析系统、流动型数字图像法有形成分分析系统、静止型数字图像法有形成分分析系统。

虽然尿液有形成分分析仪具有检验快速、人为误差小、重复性好、精密度高、安全等优点,但由于尿液的成分复杂,标本中可能含有结晶、小圆上皮细胞、菌尿、白带混入、精液等,干扰尿液有形成分分析仪检测结果,近年来也屡见有关菌尿对尿液有形成分分析仪检测尿红细胞的影响等研究报道[1-3]。

尽管很多仪器都设置了复检功能,对可疑的标本或干化与尿液有形成分结果不一致的标本提示审核复检,但也会出现干化与尿液有形成分结果表面一致的现象,特别是各种成分混合的标本,就比如本文提到的真菌和红细胞混合的例子。

因此建议在使用尿液有形成分分析仪的时候,对仪器未提示审核复检的阳性标本进行浏览复检(低倍和高倍图片各一幅),而提示审核复检的标本则按操作规程全部图片复检,必要时人工镜检复检,既可保证工作效率,又能降低样本漏检、误检的几率。

参考文献

[1]马骏龙,丛玉隆.菌尿对尿液分析仪测定红细胞的影响[J].中华医学检验杂志,1999,22(4):205-207.

[2]刘旗,王明丽,徐笑红.菌尿对IQ-200尿液分析仪测定尿红细胞的影响[J].实验与检验医学,2008,26(3):326-327.

[3]郑沁,赵儒,黄茜等.细菌或真菌对UF-1000i尿沉渣分析仪红细胞检测的影响[J].检验医学,2012,27(8):663-666.

说明:本文为原创投稿,不代表国际检验医学传媒、检验医学微信平台观点。转载时请注明来源及原创作者姓名和单位。

编辑:徐少卿 审校:陈雪礼

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