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一文搞懂肺结核X-Pert检测和γ干扰素释放试验!

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区别都在这儿!

作者|李贺

来源|杏林医李

分子检测方法可用于检测结核分枝杆菌复合群DNA和与耐药相关的常见突变。分子学检测有两种主要类型:基于探针(非测序)的检测基于测序的检测

Xpert MTB/RIF检测是一种分子信标检测方法,可用于检测结核分枝杆菌和位于rpoB基因81-bp区域(密码子426-452)的利福平耐药突变,该区域被称为利福平耐药决定区(rifampicin resistance–determining region, RRDR)。

该检测可用于疑似或已接受抗分枝杆菌治疗少于3日的疑似肺结核成人的痰抗酸杆菌涂片阳性或阴性样本(直接或浓缩样本,可为自发产生或诱导)。Xpert MTB/RIF检测在2011年得到了WHO的批准,并在2013年得到了美国FDA的批准。

Xpert MTB/RIF检测的可行性、诊断准确性和有效性已在低发病率、资源丰富环境下以及高发病率、资源有限环境下得到了证实。该检测有可能显著缩短诊断所需时间(可在2小时内得到结果)和开始有效治疗所需的时间。Xpert MTB/RIF检测仅需简单培训即可掌握,不易发生交叉污染,并且只需极少的生物安全设施。最快可在2小时后就得到结果。

该检测需要稳定的电源,且操作室的温度低于30°C。痰液样本应具备良好的质量,并通过常规实验室方法浓缩以获得最佳敏感性,但也可以使用未浓缩的痰样本。Xpert MTB/RIF检测的敏感性高于涂片镜检,且特异性非常高。

2010 年新英格兰杂志公布了一项多中心的研究结果,研究结果表明,以培养为参考标准,Xpert MTB/RIF 的灵敏度为 92.2%,特异度为 99.2%。近年来,Xpert MTB/RIF 技术已在多个国家和地区完成了诊断效果的研究和评估,其诊断疑似结核感染的敏感性为 88% (95% CI 83%~92%),特异性为 98% (95% CI 97%~99%)

WHO推荐:

  • 当成人和儿童患者怀疑 MDR-TB 感染或合并 HIV 感染时,强烈推荐 Xpert MTB/RIF 作为首选检测方法,从而替代传统的涂片镜检,培养和药物试验的方法;

  • 对疑似肺外结核患者的肺外标本如脑脊液,淋巴结和其它组织,推荐 Xpert MTB/RIF 作为检测方法;

  • 对于痰涂片检测阴性的患者,推荐 Xpert MTB/RIF 作为后续检测方法。

Xpert MTB/RIF检测对于监测治疗效果没有价值。但是,Xpert MTB/RIF检测可用于代替连续痰抗酸杆菌涂片,以帮助决定是否应继续对疑似结核病患者进行空气传播感染隔离。

什么是γ干扰素释放试验?

γ干扰素释放试验分析技术IGRA是一种用于结核杆菌感染的体外免疫检测的新方法。检查结核感染者体内存在特异的效应T淋巴细胞,效应T淋巴细胞再次受到结核抗原刺激时会分泌INF-γ。

Th1 细胞介导的细胞免疫应答的机体对结核分枝杆菌的主要免疫应答方式,因此可将结核杆菌特异的 T 淋巴细胞作为结核菌感染的检测指标。鉴于此,γ- 干扰素释放试验利用结核杆菌感染者外周血之中存在结核杆菌特异性 T 淋巴细胞,而这些 T 细胞一旦再次接触结核杆菌抗原就会发生增殖和分化,从而释放 IFN-γ。

(图片来源:百度百科)

两者有何区别?

1.检测原理不同,一个为分子检测方法,另一个为免疫检测法;

2.阳性结果的意义不同。X-pert阳性可以确定为结核活动,γ干扰素阳性也可能为潜伏期肺结核或曾经感染过肺结核;

3.X-pert检测相对复杂,技术要求高,需要分子的扎实基础和娴熟的实验操作,而γ干扰素释放试验相对简单;

4.疑似肺外结核患者,X-pert检测更有优势。

参考文献:

1.WHO Guidelines Approved by the Guidelines Review Committee. In: Fluorescent Light-Emitting Diode (LED) Microscopy for Diagnosis of Tuberculosis: Policy Statement [J]. Geneva: World Health Organization , 2011.

2.Philipsen RH, Sanchez CI, Maduskar P, Melendez J, Peters-Bax L, Peter JG, Dawson R, Theron G, Dheda K, van Ginneken B. Automated chest-radiography as a triage for Xpert testing in resource-constrained settings: a prospective study of diagnostic accuracy and costs [J] . Scientific reports, 2015, 5:12215.

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