打破高端质控试剂对外依赖！翌圣生物联合中检院发表支原体快速检测技术研究论文

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（来源：细胞与基因治疗领域）

近日，由中国食品药品检定研究院牵头，翌圣生物科技（上海）股份有限公司深度参与合作的《Establishment of Nucleic Acid Amplification Technology for the Detection of Mycoplasma in Biological Products》研究论文正式刊发，给国内生物制品的支原体质控体系升级，带来一份极具参考价值的权威科研成果。

作为国内生物医药工具酶与分子诊断试剂龙头企业，翌圣生物深耕核酸扩增核心原料与整套检测方案多年，拥有成熟的 qPCR、LAMP 等多平台支原体检测技术体系、高保真聚合酶、防污染体系以及完整方法学验证经验。本次与中检院携手开展联合研究，双方发挥各自优势：中检院立足国家药品质量监管权威视角，把控方法合规性、通用性与评价标准；翌圣生物输出成熟核心酶原料、配套试剂体系与大量实操验证数据，协同完成整套生物制品支原体核酸扩增检测方法的体系搭建、性能验证与数据论证。

在课题研究过程中，团队严格对标国内生物制品质量管控法规要求，系统性完成特异性、灵敏度、重复性、抗干扰性等全套方法学验证。整套检测方案稳定性强、灵敏度优异，能够精准识别各类常见污染支原体菌株，可适配抗体药、细胞制剂、慢病毒载体、重组蛋白、疫苗等多品类生物制品样本检测场景，兼顾实验室常规质控与规模化生产在线筛查需求。

此次联合论文的发表，意义深远。一方面，文章形成了具备权威性、实操性的技术参考依据，填补国内生物制品核酸法支原体检测标准化研究的实践资料，为药企、CDMO、检测实验室搭建合规检测平台提供清晰技术指引；另一方面，印证了国产分子试剂原料完全能够匹配国家级权威质控研究严苛标准，打破高端质控试剂对外依赖的局面，夯实生物医药质控产业链自主可控根基。

自成立以来，翌圣生物始终聚焦生物医药上游核心工具研发，持续联动中检院、各大药检所、头部药企、高校研究院开展标准共建、联合攻关。从参与团体标准制定，到携手国家级权威机构产出高水平学术成果，企业一步步以硬核技术助力国内生物安全质控水平提升。

未来，翌圣生物将持续加码 CGT、疫苗等热门赛道质控技术迭代，打磨更高性能、全场景覆盖的支原体、病毒、宿主 DNA 残留等全套质控试剂方案，持续深化与国家级权威平台、行业伙伴的产学研协同创新，以本土核心技术守护中国生物制品安全，助力我国生物医药产业高质量、规范化发展。

支原体污染是细胞培养、细胞治疗产品、疫苗、基因药物等生物制品生产全流程中重大安全风险点。传统培养法检测周期长、灵敏度有限，难以适配当下细胞与基因治疗（CGT）产业高速发展下高效、精准质控的刚需。核酸扩增检测凭借灵敏度高、速度快、通量高等优势，已然成为行业替代传统方法的主流方向，但标准化、可落地、适配国内监管要求的成熟检测方案，仍是行业亟待夯实的关键。

监管机构要求的支原体检测点

• 2020版中国药典三部《生物制品生产检定用动物细胞基质制备及质量控制》中提出对于生产用细胞，需要对主细胞库（MCB）、工作细胞库（WCB）、生产终末细胞（EOPC）进行支原体检查。

• 《免疫细胞治疗产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》中建议在关键时间点对适合的中间样品开展支原体等安全性相关检测或采取相关的措施加以控制，并且支原体同样需要作为终产品的放行检项。

• FDA,Guidance for Industry:Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infectious Disease Indications，中提出对于原材料、病毒种子、未加工的收获液等都需要进行支原体控制。

NAT法和传统方法

在快速检测方法（NAT，核酸扩增技术）出现之前，传统的培养法和指示细胞法因其检测周期长或灵敏度问题，致使企业生产或产品放行周期拉长或者需要基于风险评估对细胞原料进行条件放行或者寻求其他替代方法。而随着细胞基因治疗的发展，行业内对支原体检测时效性和灵敏度要求越来越高，短的货架期不足以支撑如此长的检测周期，因此NAT方法从众多支原体检测方法中脱颖而出。

目前欧洲药典（EP）<2.6.7>，日本药典（JP）以及美国药典（USP）<63>都已收录NAT方法作为支原体检测方法，但需要对该方法进行验证以及与传统方法进行对比其检测灵敏度不低于传统方法，才可以使用。2020版中国药典（ChP）虽然并未收录NAT法作为支原体检测方法，但其中也提到了“也可采用经国家药品检定机构认可的其他方法”。2022年5月，国家药监局药审中心发布的《免疫细胞治疗产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》中提到“当检验样品量有限，或需要快速放行等特殊情况下，如药典方法无法满足，可考虑开发新型的无菌和支原体的检测方法进行放行检测，但是新型检测方法应经过充分验证”。所以NAT法有望作为能够支持快速支原体放行检测的方法，被越来越多的原材料供应商、以及ATMP企业所使用。

中外法规里列举的支原体检测方法

翌圣生物MycAway®支原体qPCR检测试剂盒（探针法）(2G)是基于NAT (nucleic acid amplification techniques)的一种快速定性检测生产原料、细胞库、病毒种子、病毒或细胞收获液、治疗用细胞中潜在支原体污染的产品。

该试剂盒基于定量PCR技术，采用多重PCR的方法，使用2种荧光探针，FAM和CY5，分别检测目标序列和内参。该2G版本可覆盖多达183种支原体DNA序列，还可兼容更多品牌的qPCR仪器。

同时，MycAway®支原体qPCR检测试剂盒（探针法）(2G)也严格按照EP 2.6.7进行专属性、检测限、耐用性的全面验证，检测限满足≤10 CFU/mL的要求。同时覆盖USP、JP、WHO、ChP等中要求验证的支原体菌株类型，试剂盒性能符合中外法规要求，助力生物医药客户的药物研发项目临床实验申请等的顺利受理。

产品资质：

✅️ 符合法规：按照EP2.6.7、JP G3和USP 63药典要求验证，符合国际权威机构的标准

✅️配合审计：产品生产符合ISO13485质量体系标准，有完善的审计文件

✅️ 保障品质：试剂盒所需酶原料全自产，且已产业化，供货稳定

✅️ 技术经验积累：TaqMan法有技术沉淀，Kit灵敏度可达10CFU/mL及以下

✅️ 专注产品性能：Taq酶抗体库，双封闭抗体提高了Kit特异性、灵敏度、稳定性

产品特点：

✅️ 检测种类多：优化的TaqMan探针可检测多达183种支原体

✅️ 操作简便：样本制备和检测总时长<3h，无需培养法的28天等待

✅️ 灵敏度高：检测限达到可以替代直接培养法的10CFU/mL

✅️ 专属性强：针对16s rRNA设计引物探针，不与梭菌、乳杆菌等亲缘关系物种交叉反应

✅️ 安全性高：试剂盒内阳性对照(PC)无感染性，完全消除污染风险

✅️ 防干扰强：引入内部质控(IC)，可排除样本干扰、反应配制异常等因素，有效避免假阴性

翌圣生物NAT法支原体qPCR检测——完整解决方案

翌圣生物MycAway™支原体qPCR检测试剂盒(探针法)能够与MolPure®磁珠法残留DNA样本前处理试剂盒搭配使用，可以通过手动提取或者使用自动化核酸提取仪自动提取样本核酸。样本经过前处理去除干扰杂质获得纯化的支原体DNA后，通过qPCR收集探针的荧光信号，从而对检测结果进行判定。

验证内容：

产品信息：

翌圣生物

翌圣生物科技（上海）股份有限公司成立于2014年，是一家聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事核苷酸、蛋白、细胞和类器官四大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业。公司兼备核心技术自主研发和规模化生产能力，核心产品数量达数千种，覆盖分子克隆、qPCR、NGS、体外转录、抗体、蛋白纯化及分析、细胞培养、转染、报告基因检测、类器官以及GLP-1核心原料等，广泛应用于生命科学研究、诊断检测、生物医药以及大健康等领域。