益生菌产品(如酸奶、乳酸菌饮料、益生菌胶囊)的核心质量指标之一就是活菌数。准确测定活菌数,对于产品研发、过程控制、货架期研究和标签宣称验证都至关重要。而要获得准确的活菌计数结果,离不开对检测方法和培养基的严格质控,而质控的核心就是标准菌株。益生菌通常包括乳杆菌属、双歧杆菌属、链球菌属等,它们的营养需求和培养条件(如厌氧条件、特殊培养基)各不相同。因此,在建立或验证一个针对特定益生菌产品的计数方法时,必须使用该种益生菌的标准菌株。例如,对于含有嗜酸乳杆菌的产品,在进行方法验证时,需要使用嗜酸乳杆菌ATCC 4356作为标准菌株。验证过程通常包括:第一步,制备标准菌株的新鲜菌悬液,并进行10倍系列稀释。第二步,选择几个适宜的稀释度,分别用待验证的计数方法(如倾注法或涂布法)和目标培养基(如MRS琼脂)进行培养,同时用参考方法或参考培养基进行平行试验。第三步,对所有平板上的菌落进行计数,计算回收率。如果使用标准菌株在目标培养基上的回收率不低于在参考培养基上的回收率(如≥70%),则证明该方法适用于该种益生菌的计数。其次,对于双歧杆菌这类专性厌氧菌,培养条件(如厌氧罐、厌氧工作站)的有效性验证也需要用到标准菌株。在进行样品检测的同时,将双歧杆菌ATCC 15697的标准菌株接种到同样培养基上,放入厌氧系统中培养。如果标准菌株生长良好,则证明当天的厌氧条件合格,样品的结果才可信。第三,在产品货架期研究中,需要定期监测活菌数的变化。为了确保不同时间点的检测结果具有可比性,每次检测都应使用同一批次的标准菌株作为阳性对照。如果标准菌株的计数结果在各次检测中保持一致,则证明检测过程稳定,活菌数的变化真实反映了产品在储存过程中的衰减情况。南京乐诊提供多种益生菌标准菌株,包括嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌、嗜热链球菌等,每支菌株都经过严格鉴定,可满足益生菌企业的研发和质控需求。
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