康德学术 | 准确度高！四个microRNA联合检测用于早期胰腺癌诊断

胰腺癌是一种恶性程度极高的消化系统肿瘤，五年生存率约10%。胰腺癌发病率和死亡率近年来明显上升，位列我国恶性肿瘤死亡率的第7位，全球范围内均呈快速上升趋势，预计到2030年将成为癌症死亡的第二大原因。目前临床上缺乏高灵敏度和高特异性的胰腺癌诊断标志物，microRNA是由17-25个核苷酸组成的非编码RNA，在血液中相对稳定，并与胰腺癌细胞的增殖、侵袭和转移密切相关。令人惊喜的是，康德生物科研团队在Digestive Diseases and Sciences发表的文章，发现了4-microRNAs panel用于早期胰腺癌的诊断具有极大的临床应用前景。

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标志物筛选

选取300例回溯性临床样本，通过高密度基因芯片方法比较癌旁组织、早期癌变组织（胰腺上皮内瘤变Ⅲ-ⅡA）及中晚期胰腺癌（>ⅡA）组织，筛选出143 种差异表达的microRNA，经过优化筛选确定了27种差异高表达miRNA分子，经过3次临床回溯性验证，确定4种差异高表达的microRNA（hsa-miR-132-3p、hsa-miR-30c-5p、hsamiR-24-3p和hsa-miR-23a-3p）作为早期胰腺癌联合诊断指标。

图1. PDAC患者候选miRNA的表达水平

标志物验证

为了确认这4种miRNAs是否可以作为诊断标志物，研究者在双通道RT-PCR检测1273名受试者其血清miRNAs表达水平，观察到慢性胰腺炎（CP）和胰腺癌（PDAC）等其他胰腺疾病患者的水平显著高于健康人HC，然而，hsa-miR-23a-3p水平在CP和HC患者之间并无明显差异（p = 0.22）。与非PDAC患者相比，PDAC患者在早期（TNM期≤IIA）和晚期（TNM期＞IIA）中4种miRNAs均出现明显的过表达。试验表明，4种miRNAs具有早期诊断胰腺癌的潜力。

图2.在组织和血清标本中验证候选miRNA

在训练队列(n=635)中，4-miRNAs panel区分早期胰腺癌和非胰腺癌的灵敏度为93.8% (89.4%-98.2%)，特异度为75.7% (71.2%-80.2%)，准确度80.1% (80.1%-80.2%)，AUC为0.924。4-miRNAs panel区分早期胰腺癌和慢性胰腺癌的灵敏度为81.4% (74.2%-88.6%)，特异度为86.7% (76.7%-96.6%)，准确度82.9% (82.7%-83.1%)，AUC为0.905。区分早期胰腺癌和健康人的灵敏度为92.9% (88.2%-97.6%)，特异度为92.9% (89.3%-96.5%)，准确度92.9% (92.9%-92.9%)，AUC为0.971。

在验证队列(n=638)中，4-miRNAs panel区分早期胰腺癌和非胰腺癌的灵敏度为95.1% (91.0%-99.3%)，特异度为77.0% (72.7%-81.4%)，准确度81.1% (81.0%-81.2%)，AUC为0.861。4-miRNAs panel区分早期胰腺癌和慢性胰腺癌的灵敏度为80.6% (72.9%-88.2%)，特异度为82.2% (71.1%-93.4%)，准确度81.1% (80.9%-81.3%)，AUC为0.814。区分早期胰腺癌和健康人的灵敏度为94.2% (89.7%-98.76%)，特异度为92.4% (88.7%-96.1%)，准确度93.0% (93.0%-93.1%)，AUC为0.933。

图3. 4-miRNAs panel在区分早期PDAC 患者和非PDAC 受试者（CP/HC）的性能

为了进一步证明4-miRNAs panel在早期PDAC检测中的性能，研究人员将该面板与临床应用中常规使用的四种生物标志物(CA125、CA19-9、CA242和CEA)进行了比较。结果显示，4-miRNAs panel的总体表现明显优于常规用于区分早期PDAC受试者和非PDAC受试者、CP或HC的生物标志物(图4)。

图4. 4-miRNAs panel检测胰腺癌的ROC

miRNA联合检测的特异性

为了评估4-miRNAs panel区分PCa和其他消化系统肿瘤的能力，研究者分别招募了结肠直肠癌(n=29)、肝癌(n=7)、食管癌(n=6)和胃癌(n=9)患者。其中，使用PDAC与非PDAC的鉴别模型将46例肿瘤预测为非pca，特异性为90.2%（表3）。这些数据表明了4-miRNAs panel可以区分胰腺癌和其他消化道肿瘤。

康德学术|准确度高！四个miRNA联合检测用于早期胰腺癌诊断

研究结论

研究者针对早期PDAC患者和健康受试者展开了一项回顾性的临床试验，发现了4个miRNA组成的Panel（hsa-miR-132-3p、hsa-miR-30c-5p、hsamiR-24-3p和hsa-miR-23a-3p）可用于PDAC患者早期检测，为miRNA用于早期诊断PDAC患者提供了强有力的证据。