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产品名称:ATTO 647 amine,ATTO 647 NH2,ATTO 647氨基,AT 647 amine的物理特性
1. 化学结构与分子特性
分子式与分子量:
基础结构为罗丹明类染料,氨基衍生物(如ATTO 647N-amine)分子式通常为C₄₀H₅₉N₄O₄S⁺(分子量约694.81-762.99 Da,不同来源略有差异),含磺酸基增强水溶性,氨基(-NH₂)提供反应位点。
与活化羧基(如NHS酯、TFP酯)偶联时,形成稳定酰胺键,适配蛋白质、抗体、核酸的共价标记。
2. 光谱特性
激发/发射波长:激发峰645-660 nm,发射峰663-670 nm(红色荧光),适配488 nm/633 nm激光器,适配多色标记(如与AF488、Cy5联用)。
光物理优势:
量子产率0.65-0.70,摩尔消光系数高达150,000 M⁻¹cm⁻¹,低浓度下仍具强荧光信号。
大斯托克斯位移(~20 nm),减少激发-发射串扰,提升成像分辨率。
pH稳定性:在pH 4-11范围内荧光强度稳定,耐酸碱及氧化环境,适配复杂生物样本。
光稳定性良好:抗光漂白能力强,支持长时间动态追踪(如活细胞迁移、单分子检测),优于传统染料(如FITC)。
3. 物理化学性质
溶解性与稳定性:
水溶性:磺化结构增强亲水性,适配水相实验体系(如细胞培养、缓冲液),减少聚集。
储存条件:-20℃避光干燥保存,避免反复冻融;溶解后建议4℃短期使用,防止荧光淬灭或化学降解。
热稳定性:高温下仍保持结构稳定,适配高温实验条件(如PCR、电泳)。
4. 反应性与生物兼容性
反应机制:氨基与活化羧基(如NHS酯)发生亲核取代反应,形成稳定酰胺键,反应条件温和(pH 7.2-8.5,室温30-60分钟),避免非特异性结合。
生物兼容性:
低细胞毒性:活细胞实验中,低浓度下对细胞活性影响小,适配活细胞成像(如共聚焦、超分辨显微镜)。
组织兼容性:组织切片中特异性结合抗原,支持免疫荧光及病理分析,无显著非特异性结合或炎症反应。
反应优化:需避免含氨基缓冲液(如Tris)干扰,推荐PBS或碳酸氢钠缓冲体系;反应后需纯化(如HPLC、透析)去除游离染料。
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