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产品名称:AT 647二苯并环辛炔,ATTO 647 DBCO,AT 647 DBCO的稳定性表现
1. 光稳定性与热稳定性
光稳定性:ATTO 647染料具有高量子产率(>0.9)和良好抗光漂白能力,适合长时间动态成像(如激光共聚焦、STED显微镜)。发射波长665–669 nm(近红外区),自发荧光背景低,信噪比高,适用于深层组织成像。
热稳定性:储存条件下稳定,但高温(>40℃)或长期暴露易降解。反应需在室温至37℃进行,避免高温导致副反应或染料分解。
2. pH耐受性与生物相容性
pH稳定性:在pH 4–10范围内荧光信号稳定,生理pH(7.0–7.5)下活性最佳。pH>8.5时可能缓慢降解,需避免强碱性环境。染料为两性离子型,净电荷为零,生理条件下稳定性高。
生物相容性:PEG4连接臂增强水溶性和生物相容性,减少非特异性吸附,适合活细胞标记、蛋白质修饰及糖基化分析。DBCO基团与叠氮反应特异性强,避免与氨基/羧基副反应。
3. 应用场景与优势
生物标记:用于蛋白质、核酸、脂质或多糖的叠氮修饰标记,适配流式细胞术、免疫荧光、FRET实验及超分辨成像(如STED/PALM)。
多色成像:与AF488、AF647等染料联用,实现四色以上成像,串色干扰低,适合多通道荧光显微镜。
药物开发:在抗体-药物偶联物(ADCs)、PROTACs中作为荧光探针,追踪靶蛋白降解或药物分布。
活体成像:近红外发射穿透力强,适合活体动物模型、肿瘤转移灶定位及深层组织切片成像。
4. 挑战与注意事项
反应条件控制:需精确调节pH、温度及反应时间,避免过度标记导致生物分子活性丧失或非特异性结合。反应后需通过凝胶过滤或HPLC纯化,确保产物纯度>95%。
生物安全性:长期活细胞/体内实验需评估细胞毒性、代谢路径及潜在免疫原性。
合成工艺:需高纯度原料与严格纯化(如HPLC),优化产率与批次一致性,降低成本。
技术适配性:在超分辨率成像中需优化标记密度与光稳定性;复杂生物环境(如血液、组织)需考虑非特异性吸附与蛋白酶降解风险。
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