生物素修饰马来酰亚胺是一类结合了生物素高亲和力与马来酰亚胺巯基反应活性的化学试剂,在生物分子标记、蛋白质功能化及靶向递送系统构建中应用广泛,以下是详细介绍:
一、化学结构与特性
- 生物素(Biotin):一种小分子维生素,能与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)形成极稳定的复合物(解离常数 Kd≈10⁻¹⁵M),为分子提供靶向定位能力。
- 马来酰亚胺(Maleimide):含双键,可与含巯基(-SH)的分子(如半胱氨酸残基)发生特异性 Michael 加成反应,形成稳定的硫醚键。反应条件温和(pH 6.5-7.5),避免使用含巯基的缓冲液(如 Tris),推荐使用 PBS 或 HEPES。
- 聚乙二醇(PEG)链接:部分试剂(如 Biotin-PEG-MAL)通过聚乙二醇连接生物素与马来酰亚胺,增加水溶性、减少非特异性结合,并降低免疫原性。PEG 链提供柔性间隔臂,提高分子水溶性与生物相容性,同时降低非特异性吸附,增强表面覆盖性。
结构式:
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cas:139554-72-6,Biotin-Mal,生物素修饰马来酰亚胺
二、特点
- 可逆结合:生物素与亲和素/链霉亲和素的结合力较弱,便于从亲和素基质上温和洗脱目标分子。
- 化学反应选择性:马来酰亚胺能够选择性地与含有氨基的分子反应,提供高度特异性的标记。
- 光敏性:部分试剂(如 UV-Tracer Biotin-CONH-MAL)嵌入二苯甲酮片段,可通过紫外光(365 nm)激发荧光,实时验证标记效率。
- 操作简便:反应条件温和,适用于多种实验条件。
- 减少非特异性结合:使用 PEG 链接可以减少非特异性结合,提高实验的特异性和灵敏度。
三、储存与使用注意事项
- 储存条件:固体粉末需避光、干燥条件下 -20℃ 保存,避免反复冻融;溶液建议现配现用,未用完部分分装后 -20℃ 避光冷冻。
- 缓冲液选择:使用 PBS(pH 7.4)或 HEPES,避免含巯基的缓冲液(如 Tris)。
- 安全防护:操作时佩戴手套与护目镜,避免直接接触皮肤或眼睛。
温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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