AbMole丨OK-432：驱动NK细胞高效活化的无饲养细胞培养系统

OK432（AbMole，M9414）是一种经青霉素处理并冷冻干燥制成的溶血性链球菌Su株制剂，其主要成分为灭活的链球菌菌体及代谢产物，包含蛋白质、肽类、多糖等多种活性成分。在NK细胞培养体系中，OK432主要作为免疫调节剂发挥作用，通过激活固有免疫信号通路，促进NK细胞的活化、增殖及功能成熟。这种源于微生物的生物活性物质，为体外NK细胞的规模化培养提供了一种高效的刺激方案[1]。AbMole为全球科研客户提供高纯度、高生物活性的抑制剂、细胞因子、人源单抗、天然产物、荧光染料、多肽、化合物库、抗生素等科研试剂，全球大量文献专利引用。

经典的NK细胞培养方法

NK细胞作为天然免疫系统的关键效应细胞，可以清除病原体和肿瘤细胞，以此原理诞生了NK细胞过继法（Adoptive NK Cell Therapy）以抑制肿瘤。其中NK细胞的体外扩增效率和功能状态直接影响其后继的研究应用。传统NK细胞作培养方法依赖饲养层细胞和多种细胞因子的组合，存在成本高、操作复杂等问题。OK432（AbMole，M9414）的独特之处在于其能模拟微生物感染信号，通过激活Toll样受体（TLR）家族成员（主要是TLR4），触发下游NF-κB、AMPK等信号通路，从而诱导NK细胞进入激活状态[2]。传统NK细胞培养方法如K562饲养细胞培养系统，是通过基因工程改造表达4-1BBL和IL-15等膜结合因子的K562细胞作为滋养层，为NK细胞提供持续刺激信号。这种方法目前存在细胞污染这一致命缺陷：虽然K562饲养细胞通常会经过辐照处理使其无法增殖，但小部分细胞仍然具有增殖能力，并且可能带来饲养细胞污染；此外，如果起始的外周血单核细胞中混有T细胞，K562饲养细胞还会促进T细胞的增殖，带来额外的T细胞污染。OK432相比传统方法具有显著优势：首先，无需饲养细胞即可实现高效扩增，规避了细胞共培养的污染隐患；其次，单次刺激即可维持7-10天的增殖活性，减少操作步骤和污染风险。OK432（AbMole，M9414）在结合某些细胞因子，如IL-2（AbMole，M10296）可以进一步促进NK细胞的扩增。有研究表明NK细胞在含有700 U/mL IL-2和0.01 KE/mL OK432的培养基中培养21天后，平均扩增了637.5倍，这种扩增效率远优于仅涉及细胞因子组合的扩增系统[3]。上述产品均为科研试剂，仅供科学研究和检测使用，不得用于其它用途。

OK432促进NK细胞的体外扩增[3]

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参考文献及鸣谢

[1] Zhao-Liang Hu, Eiro Kubota, Hideo Imamura, et al., Effective induction of human NK cells with OK-432 and further augmentation of their cytolytic function by rIL-2, 38(3) (1994) 183-190.

[2] Benjamin Bonavida, Jonathan Katz, Takashi %J Cellular immunology Hoshino, Mechanism of NK activation by OK-432 (Streptococcus pyogenes): I. Spontaneous release of NKCF and augmentation of NKCF production following stimulation with NK target cells, 102(1) (1986) 126-135.

[3] H. T. M. Nhung, B. V. Anh, T. L. Huyen, et al., Ex vivo expansion of human peripheral blood natural killer cells and cytotoxic T lymphocytes from lung cancer patients, Oncology letters 15(4) (2018) 5730-5738.