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产品名称:Alexa Fluor 633 Concanavalin A的荧光特性与优势
化学结构与组成
核心成分:由Alexa Fluor 633荧光染料与刀豆凝集素A(Concanavalin A, Con A)通过化学偶联(如琥珀酰亚胺酯反应)共价结合而成。Con A为四聚体糖蛋白,分子量约100 kDa,来源于刀豆,特异性识别α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基,结合活性依赖Ca²⁺和Mn²⁺。
荧光标记机制:Alexa Fluor 633染料通过赖氨酸残基偶联至Con A,不影响其糖结合活性。染料分子量约1000-1500 Da,具有强远红外荧光特性,激发波长632 nm,发射波长647 nm。
荧光特性与优势
光谱特性:远红外荧光(632/647 nm),适配Cy5/APC滤光片通道,量子产率高,光稳定性良好,抗漂白能力强,适合长时间成像及超分辨显微镜(如STED)。
多色兼容性:与绿色(FITC/AF488)、蓝色(Hoechst 33342)染料光谱分离良好,支持多色标记实验,减少信号重叠。
背景干扰低:远红外波长(>630 nm)有效避开生物样本自发荧光,提升信噪比。
生物学功能与应用场景
糖蛋白检测与成像:
细胞表面糖蛋白:特异性标记细胞膜及胞内含α-糖基的蛋白(如糖蛋白、糖脂),用于共聚焦/超分辨显微镜观察糖蛋白分布。
流式细胞术:定量分析细胞表面糖基化水平,分选特定糖蛋白表达的细胞亚群(如肿瘤细胞、免疫细胞)。
糖链结构研究:通过竞争性结合实验解析糖分子与受体的相互作用,研究糖蛋白糖基化修饰及糖链功能。
细胞黏附与识别:监测细胞间黏附过程(如免疫细胞-肿瘤细胞相互作用),研究糖基化在细胞识别中的动态变化。
内质网与高尔基体定位:与细胞器特异性染料联用,追踪糖蛋白合成途径(如ABCA1转运蛋白研究)。
免疫激活模型:Con A可诱导T淋巴细胞增殖,用于免疫反应机制研究。
细菌细胞壁分析:标记微生物表面糖结构,探究宿主-病原体相互作用。
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