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产品名称:DSPE-PEG-cisplatin 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-顺铂的实验方案
DSPE-PEG-cisplatin 合成与制备实验方案
一、材料准备
DSPE-PEG-NH2(末端氨基聚乙二醇修饰二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)
顺铂(Cisplatin)
缓冲液(如0.9%生理盐水、PBS pH 7.4,或含Cl-离子较少的水溶液)
其他试剂(视具体连接方式)
二、合成思路
顺铂含有两个Cl-配体,可以通过配位替换反应与DSPE-PEG的末端官能团(如-NH2)结合。也有文献报道通过引入羧基或硫醇官能团实现更稳定的共价键连接。
三、具体步骤示范
1. 配体交换反应制备顺铂前体
将顺铂溶解于含低氯离子的水溶液(例如硝酸钠缓冲液),通过控制反应条件使部分Cl-被水分子置换,生成活性顺铂水合物(cis-[Pt(NH3)2(H2O)2]2+)。
反应条件:室温,避光,搅拌4小时。
2. DSPE-PEG-NH2与活性顺铂的反应
将DSPE-PEG-NH2溶解在PBS缓冲液中(pH约7.4)。
缓慢加入顺铂水合物溶液,搅拌反应12-24小时,室温避光。
通过顺铂与末端氨基的配位形成DSPE-PEG-cisplatin配合物。
3. 纯化
采用透析(MWCO适合DSPE-PEG分子量,一般1-3 kDa以上)或超滤去除游离顺铂及小分子杂质。
纯化液通过紫外-可见光吸收或ICP-MS(铂元素含量分析)确认载药量。
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四、载药量和性质检测
铂含量测定:利用ICP-MS或原子吸收光谱测定顺铂含量。
粒径和电位:通过动态光散射(DLS)和Zeta电位仪测量纳米粒子的大小和表面电荷。
结构确认:用核磁共振(NMR)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)检测配位键形成。
释放行为:模拟体液条件下检测顺铂释放动力学。
五、注意事项
顺铂对光和温度敏感,操作过程避免强光,低温保存。
配体交换和连接反应需控制pH和离子强度,避免顺铂沉淀。
纯化步骤需充分,确保游离顺铂清除,防止副作用。
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