品名:AF350 四嗪(AF350 Tetrazine)
用途:科研
一、基本描述
AF350 四嗪(AF350 Tetrazine)是一种蓝光激发的荧光染料 AF350(Alexa Fluor 350)与反应活性四嗪(Tetrazine)官能团结合形成的生物正交荧光探针。该探针能与含有反应性环烯(如TCO、norbornene、cyclooctyne等)基团的分子通过快速、特异的反应生成稳定共价产物,实现无催化剂条件下的高效点击标记。AF350 具有优良的水溶性、低背景荧光及高光稳定性,适用于共聚焦成像、细胞表面标记、体内生物成像等领域,尤其适合需要激发波长在340–360 nm的多通道系统。
二、化学性质
AF350 是一种小分子蓝光荧光染料,典型激发/发射波长约为 Ex/Em = 346/442 nm,其荧光量子产率较高,光漂白速率较低。其羧基或氨基官能化结构可进一步与四嗪通过酰胺键或酯键连接,构建出反应性探针。四嗪基团具有高度电子缺陷性,使其与跨烯类(如TCO)发生反应速率非常快(k > 10⁴–10⁶ M⁻¹s⁻¹),是生物正交反应中*快的反应对之一。
AF350四嗪在pH 6–8条件下保持稳定,具有良好的水溶性,可在不需外加铜或紫外激发的条件下实现快速标记,适合于活细胞甚至体内标记实验。
三、应用领域
生物正交标记:AF350-Tetrazine 可与TCO标记的蛋白、抗体、纳米载体快速点击偶联,实现荧光标记、跟踪与定位。
共聚焦荧光成像:其蓝光激发特性适合用于多色成像系统,与绿色、红色通道兼容性好,用于共聚焦、活细胞或组织切片荧光标记。
细胞膜或胞外标记:适合于不透膜的四嗪反应,在胞外环境中进行快速共价固定,标记效率高,背景干扰小。
原位点击化学探针开发:用于构建原位点击识别平台,将AF350-Tetrazine与TCO-药物、适配体、信号肽等结合,进行靶标筛选与生物分析。
分子追踪与药物递送监测:通过AF350四嗪的高反应速率与成像性能,可用于跟踪递送载体(如脂质体、纳米粒)在细胞或体内的分布路径。
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