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评估小鼠的梳理行为是研究强迫症(OCD)等神经精神疾病的重要方法。在进行梳理行为的视频分析时,通常关注以下几个关键指标:
Fig1 强迫行为评估
小鼠被单独放置在一个透明的塑料盒子中,使用相机进行1小时的视频录制。在录制前,小鼠有半小时的时间适应这个新环境。视频录制在特定的SPF房间内进行,房间的照明和平均温度保持在22±1℃,时间通常在早上8点到下午6点之间。每次录制后,盒子会用乙醇清洁并更换木屑床料。
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自我梳理行为:
自我梳理是啮齿动物和其他动物中一种自然且频繁的现象,包括一系列旨在清洁和维护皮毛的动作。自我梳理行为包括擦拭脸部、舔舐、抓挠和/或摩擦头部、口鼻和耳朵,也包括全身梳理。
每只小鼠的行为特征如下:
总梳理时长:1小时内自我梳理的总时间。
总梳理次数:1小时内自我梳理的总次数。
梳理次数的计算:当两次梳理之间有超过2秒的差异时,分别计算为不同的梳理次数。
短梳理次数:1小时内持续时间少于3秒的短自我梳理次数。如果梳理持续时间达到或超过3秒,则被视为长梳理。
野生型(WT)小鼠的梳理行为:
在野生型小鼠中,梳理行为的评估可以作为研究强迫症模型的基线。例如,SAPAP3基因敲除(KO)小鼠模型可以有效地模拟强迫和焦虑样行为,可对SAPAP3 KO小鼠进行了全面的表型分析,包括对毛发微观结构、焦虑和抑郁样行为以及胃肠功能的评估。
埋珠测试(Marble Burying Test, MBT)
是一种用于评估小鼠强迫行为的实验方法。在这项测试中,将小鼠放置在一个填有新木屑的透明塑料笼中,并在笼中均匀分布20个玻璃弹珠。测试持续30分钟,之后通过计算被木屑覆盖的弹珠数量来评估小鼠的埋藏行为,如果弹珠的至少三分之二表面被覆盖,则认为该弹珠被埋藏。
旷场测试(Open Field Test, OFT)
通常在MBT之后立即进行,以评估小鼠的焦虑水平和运动活动。测试在一个方形木制场地(50×50×40厘米)中进行,场地有白色墙壁和地板。小鼠在测试开始时被放置在场地中心,自由探索10分钟。使用视频跟踪系统测量小鼠在中心区域和周边区域的停留时间,以及总行程距离。每次测试前,场地都会用70%的酒精溶液进行清洁。
高架十字迷宫(Elevated Plus Maze, EPM)
用于评估小鼠的初始焦虑水平。测试装置由四个臂组成,其中两个臂有高侧墙(封闭臂)和两个臂开放(开放臂),所有臂都汇聚在一个高出地面75厘米的中央平台上。小鼠被放置在中央平台上,自由探索6分钟。视频跟踪系统跟踪小鼠的活动,并记录在每个臂中花费的总时间。在每次EPM测试前,场地都会用70%的酒精溶液进行清洁。
这些测试方法为提供了评估小鼠强迫行为和焦虑状态的工具,并可以用来评估治疗方法对这些行为的影响。通过这些行为测试,可以更好地理解强迫症等神经精神疾病的病理机制,并评估潜在的治疗方法。
文献引用:
Brownstien, M., Lazar, M., Botvinnik, A. et al. Striking longterm beneficial effects of single dose psilocybin and psychedelic mushroom extract in the SAPAP3 rodent model of OCDlike excessive selfgrooming. Mol Psychiatry (2024).
Odland AU, Kristensen JL, Andreasen JT. Investigating the role of 5HT2A and 5HT2C receptor activation in the effects of psilocybin, DOI, and citalopram on marble burying in mice. Behav Brain Res. 2021;401:113093.
Lotan A, Lifschytz T, Slonimsky A, Broner E, Greenbaum L, Abedat S, et al. Neural mechanisms underlying stress resilience in Ahi1 knockout mice: relevance to neuropsychiatric disorders. Mol psychiatry. 2014;19:243–52.
Lifschytz T, Broner EC, Zozulinsky P, Slonimsky A, Eitan R, Greenbaum L, et al. Relationship between Rgs2 gene expression level and anxiety and depressionlike behaviour in a mutant mouse model: serotonergic involvement. Int J Neuropsychopharmacol. 2012;15:1307–18.
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