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五邑大学于晖教授团队《AFM》:基于伤口渗出液供能的自供电电刺激敷料促进慢性伤口愈合

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慢性伤口的愈合过程复杂且易受感染,而电刺激(ES)技术因其能够促进细胞迁移、血管生成和胶原沉积,已成为慢性伤口治疗的研究热点。然而,传统电刺激敷料通常需要依赖外部电源,存在安全隐患、操作复杂、便携性差等问题。因此,开发一种安全、自供电、低电压且高效促进创面修复的电刺激敷料,对于慢性伤口治疗具有重要意义。

近日,五邑大学于晖教授团队联合稳健医疗有限公司、澳门理工大学、江门市中心医院等单位,开发了一种安全、稳定、简便、可持续使用且自供电(5S)的电刺激伤口敷料,即P-E-PGP敷料。该敷料的下层(E-PGP)由聚丙烯腈-氧化石墨烯(PAN-GO)和聚己内酯(PCL)组成的不对称静电纺纳米纤维膜构成,并且包含丝网印刷的银(Ag)电极和碳纳米管(CNT)电极,可实现伤口渗液的单向快速排出,提供低压直流(LVDC)电刺激信号。上层为三维聚氨酯(PU)泡沫,可显著增强渗出液管理能力,维持伤口部位的适宜湿度。体外和体内实验均证实,该敷料可有效促进伤口修复,为慢性伤口管理提供了高效、安全且便捷的解决方案。相关成果以“A Safe, Stable, Simple, Serviceable, and Self-Powered Wound Dressing With Continuous Low-Voltage Direct Current Electrical Stimulation: an Efficient Approach to Accelerate Wound Healing”发表在《Advanced Functional Materials》上。论文第一作者为五邑大学硕士研究生石晨曦,通讯作者为五邑大学于晖教授和王利环博士。合作作者包括稳健医疗有限公司研发总监王欢、江门市中心医院王筱菁主任医师,澳门理工大学李克峰副教授以及五邑大学刘鹏碧博士。

PGP膜的形貌、水渗透性及力学性能分析:PGP膜呈现出明显的不对称纳米纤维结构,其中PAN-GO层的纤维直径较小、孔径较小,而PCL层的纤维较粗、孔径较大(图2a–g),从而实现液体的单向传输。接触角测试结果表明,随着PAN-GO含量的增加,水滴传输速度显著提升(图2h)。此外,力学性能测试显示,随着PCL比例的增加,膜的强度和韧性显著提升(图2i)。

P-E-PGP敷料的渗液管理性能:印刷电极后,水滴置于PCL侧时液体渗透在9 s内完成,置于PAN-GO侧时液体在1 s内被迅速吸收(图3a, b)。对PGP膜和E-PGP膜的单向液体传输(UWT)性能进行了定量比较(图3c-f),进一步证明其单向液体传输能力。图3g显示,E-PGP膜疏水侧水滴在毛细作用下,于10 s内被泵送至亲水侧。P-E-PGP敷料的保湿时长达11 h,而E-PGP膜仅为1 h,这主要归因于E-PGP敷料内部丰富的微纳米孔结构(图3h, i)。

E-PGP膜的自供电性能:图4a显示,渗出液流动驱动阳离子迁移形成阳离子浓度梯度。Zeta电位测试(图4b)显示PCL和PAN-GO的zeta电位为-36.6 mV和-29.3 mV。开路电压测试(图4c)表明,基于双电层效应,膜的两侧形成了电位差。随着GO含量增加,输出电压由65 mV升至135 mV(图4d, e)。循环伏安分析(图4f)未见氧化还原峰,排除了电化学反应。开路电压测试(图4g)显示,E-PGP可稳定输出电压65–135 mV,持续12 h。电场分布模拟(图4h)显示其形成的微电场与内源性创缘电场相似。

E-PGP膜对成纤维细胞迁移及胶原分泌的影响:细胞活力检测(图5a, d)表明,E-PGP膜无细胞毒性,细胞存活率均超过80%。划痕实验(图5b, e)显示,E-PGP膜组24 h内划痕愈合率达93.9%,比PGP膜组高19%。Col I免疫荧光染色(图5c, f)和RT-qPCR 分析(图5g)表明,E-PGP膜可显著提高Col I的表达,进而促进胶原蛋白分泌和肉芽组织形成。

E-PGP膜对体外血管生成的影响:图6a显示,人脐静脉内皮细胞(HUVECs)在E-PGP膜上呈现较大的多边形形态,而在对照组和PGP膜上,细胞主要呈现球形。图6b表明E-PGP膜促进了更密集管状网络的形成,定量分析显示,E-PGP组的网状结构数量和管节点数比PGP组分别高27.1%和13%(图6c–e)。图6f, g显示,E-PGP膜显著提高了CD31的表达。图6h的RT-qPCR结果显示,E-PGP组CD31的mRNA表达较PGP组增加了43%。

体内创面愈合评估:图7a–c表明,相较于对照组和PGP组,P-E-PGP组在第3、7、14 天的创面愈合速度更快,第7天时伤口愈合率达61.6%,第14天时几乎完全闭合(98.5%)。H&E染色结果(图 7d, f)显示,与其他组相比,P-E-PGP组在第7天时表皮增厚,炎症细胞浸润减少,在第14天时,表皮结构更加完整。Masson染色(图7e, g)表明,P-E-PGP组在愈合过程中胶原纤维显著增加。

体内胶原沉积及血管生成评估:Col I免疫组化染色结果(图8a)显示,第14天时,P-E-PGP组的Col I表达量显著增加。图8b的定量分析表明,P-E-PGP组和E-PGP 组的胶原含量显著高于对照组和PGP组。CD31免疫组化染色结果(图8c)显示,P-E-PGP组的毛细血管密度明显增加。图8d的定量分析进一步表明,P-E-PGP组的血管密度相比PGP组提高了90.6%。

综上,P-E-PGP敷料通过结合优异的渗出液管理能力与稳定的低压直流电刺激,在无需外部电源的情况下加速伤口愈合,具有良好的生物安全性和临床应用潜力,为慢性伤口治疗提供了一种创新的自供电电刺激治疗策略。

来源:高分子科学前沿

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