电泳缓冲液三羟甲基氨基甲烷的原理和配制方法

电泳是生物学和化学实验中常用的技术，而三羟甲基氨基甲烷则是电泳实验中常用的缓冲剂。了解三羟甲基氨基甲烷的原理和配制方法对于进行电泳实验具有重要的意义，因此本文将详细介绍三羟甲基氨基甲烷的原理、作用、配制方法和注意事项。

一、工作原理

三羟甲基氨基甲烷，是一种弱碱，其分子式为C4H9NO3。在电泳实验中，三羟甲基氨基甲烷主要起到调节溶液pH的作用。其原理在于，三羟甲基氨基甲烷分子中含有氨基和羧基，可以在水中解离出H+和OH-，从而起到调节溶液酸碱性的作用。此外，三羟甲基氨基甲烷还具有稳定DNA和蛋白质的性质，合适的pH值使DNA和蛋白质免受酸碱破坏。

二、作用

调节pH：三羟甲基氨基甲烷可以中和溶液中的H+或OH-，从而调节和稳定容易的pH值。在电泳实验中，适宜的pH可以保证DNA和蛋白质的稳定性，提高电泳分离效果。

保护DNA和蛋白质：三羟甲基氨基甲烷可以与DNA和蛋白质结合，减少DNA和蛋白质在电场中的受损程度，提高电泳分离的分辨率。

提高电导率：三羟甲基氨基甲烷分子中的氨基和羧基可以解离出H+和OH-，提高溶液的电导率。在电泳实验中，高电导率可以加快电流的传导速度，缩短电泳时间。

三、配制方法

母液配制：将三羟甲基氨基甲烷粉末溶解在蒸馏水中，制成1M 三羟甲基氨基甲烷母液。注意要缓慢加入三羟甲基氨基甲烷粉末，边加入边搅拌，避免形成结块。

工作液配制：根据实验需要，将适量的母液加入蒸馏水或缓冲液中，制成适宜浓度的三羟甲基氨基甲烷工作液。一般情况下，三羟甲基氨基甲烷浓度为0.05M至0.2M之间。

四、注意事项

三羟甲基氨基甲烷应储存于密封容器中，避免吸潮。在使用前应检查三羟甲基氨基甲烷是否含有杂质或颗粒物，如有需要应进行过滤处理。

在配制工作液时，应使用玻璃容器或塑料容器，金属容器可能会与三羟甲基氨基甲烷发生化学反应，从而影响实验结果，因此应该尽量避免使用金属容器。

三羟甲基氨基甲烷溶液建议现配现用，实在用不完的溶液短时间在4℃环境下保存，长时间在零下20℃的环境中保存。

在配制和使用过程中，需要做好防护措施，避免直接接触到人体皮肤，如果不小心沾到皮肤，也不用过于惊慌，首先用大量净水冲洗，仍感觉不适则需要尽快就医。

在进行电泳实验时，应根据实验要求选择适宜浓度的三羟甲基氨基甲烷缓冲液。

三羟甲基氨基甲烷作为电泳缓冲剂在生物学和化学实验中具有重要的作用，因此选择高品质的三羟甲基氨基甲烷可以避免电泳实验结果的误差。