云南
推荐:慢病毒浓缩液Lentivirus Precipitation Solution
产品描述
Lentivirus Precipitation Solution(慢病毒浓缩液)是一种简单、快速、高效的慢病毒浓缩试剂,能够对所有类型的慢病毒颗粒进行简单且有效的富集。该试剂操作简便,仅需将慢病毒原液和5×慢病毒沉淀浓缩液按比例混合,孵育一定时间,即可用普通高速离心机离心富集,得到浓缩的慢病毒颗粒,回收率可达90%以上,提高 100 倍病毒滴度。
储存与运输
冰袋(wet ice)运输;4℃保存,12 个月有效。
推荐:慢病毒浓缩液Lentivirus Precipitation Solution
操作步骤
1. 收集慢病毒上清液,用 0.45μm 滤膜(推荐使用低蛋白吸收的 PES 膜)的无菌滤器过滤除去细胞和碎片(在过病毒原液之前,滤膜可用 3-5 mL 预冷 PBS 提前过一次);
2. 将慢病毒上清液与 5×慢病毒沉淀浓缩液按 4:1(病毒上清液 4 份,病毒浓缩液1 份)的比例颠倒混匀,将混合液于 4℃孵育 2 h,期间每隔 30 min 上下颠倒 10 次混匀,或置于4℃孵育过夜(适当延长孵化时间可以提高病毒回收率);
3. 孵育一定时间后,于 4℃,8000 g 离心 10~15 min;
4. 小心去除上清,用原体积 1/10~1/100 的 DMEM 或 PBS 重悬慢病毒颗粒(部分情况下,沉淀物不一定肉眼可见),轻轻吹打均匀,重悬沉淀物后,可以测定浓缩慢病毒样品的滴度后根据实验使用量分装并置于-80℃保存(尽量减少慢病毒反复冻融的次数,以免降低病毒滴度)。
注意事项
1. 本试剂盒不提供滤器和注射器,请自备滤器和注射器。
2. 本试剂盒成分虽然对慢病毒反复冻融有一定的保护作用,但是请尽量避免慢病毒反复冻融。
3. 操作时请穿好实验服、戴好手套。
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