微源检测开发利用液相色谱-串联质谱技术检测脑组织中胆固醇含量

胆固醇（Cholesterol），又称为胆甾醇，是一种环戊烷多氢菲的衍生物，溶解性与脂肪类似，不溶于水，易溶于乙醛、氯仿等溶剂，普遍存在于动物体内，而植物中一般不含或只含微量。是人体内丰富的固醇类化合物，是参与形成细胞膜，合成胆汁酸，维生素D以及留体激素的前体物质，另外在体内全身各组织中，大脑含有胆固醇最高，是其他组织的3～5倍，占脑组织总重量的2%左右。

另外根据学者专家研究发现，胆固醇在神经元内的分布、含量的异常都是引起神经元变性、死亡的重要因子，在维持细胞膜完整性、髓鞘形成、突触发生和神经传递中起着至关重要的作用。当神经元发育成熟后，神经元合成内源性胆固醇的功能逐渐被星形胶质细胞和少突胶质细胞取代。一旦脑组织中胆固醇的动态平衡失衡可能会引发多种疾病，因此对脑组织中胆固醇的检测是非常有必要的。

胆固醇的定量分析方法传统利用比色法、酶法等。其中比色法操作手续繁杂，特别是样品的前处理和样品中脂肪的提取，而且所需试剂多，造成了比色结果的偏差和计算结果的复杂化；酶法技术含量较高，特异性强，但是需要注意的是胆固醇与植物甾醇在结构上十分相似，传统的比色法和酶催化法在相关检测上存在局限。杭州微源检测实验室现开发利用液相色谱-串联质谱技术（LC-MS/MS）检测脑组织中胆固醇含量。

利用三重四极杆质谱仪，色谱柱Waters Cortecs 2.7μm 2.1×100mm Column ，流动相A：0.1%甲酸水溶液，流动相B：0.1%甲酸甲醇溶液。离子源：APCI ，干燥气流量：4 L/min，雾化气压力20 psi，毛细管电压：2000 V，电晕电流：4 μA，EMV增益：200 V，采集模式：正离子MRM。

液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析技术可同时检测多组分，利用混合物中各组分物理化学性质的差别（如吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等），使各组分在支持物上集中分配在不同部位，达到分离的目的。然后，进入质谱仪进行测定。检测精准度高、特异性高、灵敏度高、样本用量较少、分析时间短、检出限低、抗干扰能力强、样品基质对目标化合物无干扰。

但是不同样品需要进行不同的前处理，专业性较强，微源检测实验室拥有完善的配套设施和专业的检测人员，遵照ISO17025和GMP等高标准进行实验室管理，利用色谱质谱等多类专业检测仪器，为生物医药领域伙伴产品生产过程中可能产生的杂质提供评估报告、方法开发、验证及样品检测等一系列完整的解决方案。

注：文章标准引用Agilent公司相关文献资料，侵删。