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国内外对于生产羟基酪醇的研究

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自然界里以自由态存在的HT很少,主要是在橄榄果实的成熟过程中橄榄苦苷的水
解过程中形成。因此HT需要用酶法或者化学方法水解复杂的酚类物质来获得。自然界里 HT是靠酶法,尤其是葡萄糖苷酶作用下水解作用形成的。然而在实验室和工厂里酸法使用较多。有人研究过从橄榄油生产过程中产生的废水里提取HT,还有人使用酶法合成HT。但是从橄榄叶中直接提取羟基酪醇还没有受到关注。橄槛叶通常情况下被烧掉或者作为堆肥留在了原来的农场里。工业上对橄榄叶的开发也只限于作为动物饲料或者本草疗法。
橄榄叶中多酚的含量还未知,每100g橄榄叶中多酚含量范围为1.5-7.0g。但是,可以确定的是橄榄叶中的多酚的成分和橄榄油中的相似。橄榄苦苷和其他的裂环烯迷萜类构成其基本成分,当然还有一些简单酚类,例如HT,但是含量很少。
Cristin等研究了用酸和碱提取油橄榄叶及对用酸碱分解油橄榄叶提取物的情况。
取一定量油橄榄叶粉末,用甲醇水溶解,加入1mol/L的盐酸或NaOH溶液,搅拌2h、溶液分成2份,一份用NaOH或盐酸中和至中性,另一份搅拌24h后,用NaOH或盐酸中和至中性。结果发现,酸水解2h后,橄榄苦苷含量减小,碱水解2h后,样品图谱中橄榄苦苷峰很小。
Ortega-Garcia使用有机溶剂甲醇直接从橄榄叶中提取得到羟基酪醇。将橄榄叶打成粉末,加入甲醇,经过剧烈振动以及沉降后,取出甲醇相,在甲醇内加入己烷再次剧烈震荡分离甲醇相。利用液相色谱分离得到羟基酪醇。


Guillermo等将橄榄油生产过程中产生的HT含量丰富的废水通过一个强阴离子交换器,然后用水洗脱。然后将洗脱液真空旋转蒸发,得到浓缩液。接着使用一种叫做 XAD型的树脂将其纯化。这次使用的洗脱液为乙醇:水等于30:70,收集HT含量不同的组分。接着又比较了HT和Vc的还原力,以及清除自由基能力。发现物质的量相同的情况下,HT显示了强于VE的三价铁还原力以及清除自由基的能力Mirela Rada 等将分子蒸馏技术应用于羟基酪醇的提取中。通过橄榄叶提取物的SPD蒸馏处理,获高附加值的化合物。过程分为两步:首先,乙醇浸提橄榄叶,然后和丙三醇混合。分子蒸馏富含橄榄叶提取物的丙三醇混合物,结果显示,在压力为1.5-2.0Mbar温度为190℃,流速为15mL/min的条件下得到羟基酪醇含量为80.9%的混合物。
Zouhaier等将用藻酸钙包埋法固定绿脓杆菌休眠细胞,然后利用这种细菌将酪醇转化为羟基酪醇。固定化的细胞耐酪醇的浓度要高于自由态的细胞,从而显示了很强的优势。当酪醇的浓度为5g/L,固定于藻酸钙的细胞单批的生物转化率达到86%。

由于生物催化剂的可重复利用性可以达到四批以上,并且单批产率高于85%,所以固定化
细胞显示了较为稳定的活动稳定性。
Noureddine等利用粘质沙雷菌,它可以利用酪醇为碳源和氮源,生产羟基酪醇。在粘质沙雷菌的P-酪醇浓度为1g/L对数增长期末尾将P-酪醇浓度调整为2g/L,经过7小时的孵化期后,羟基酪醇的产率为80%s。Juan等使用蘑菇酪氨酸酶合成了羟基酪醇。在酪氨酸酶、Vc以及酪醇存在的条件下,在一定温度下得到了羟基酪醇。


Noureddine等通过优化从橄榄油生产废水中提取羟基酪醇的过程。实验发现乙酸乙酯是从橄榄油生产废水中回收酚类单体的最有效的溶剂。并且需要调节废水的pH=2。通过三个连续的液-液逆流提取过程,得到产品的HT含量可以达到85.46%。1L橄榄油生产废水中得到了1.225gHT5]
Mar Larrosa等采用酪氨酸酶催化酪醇,经过羟基化反应后合成羟基酪醇。但是过程中要控制合成条件,以防氧化生成联苯。把合成的羟基酪醇加入到番茄汁里面。
发现番茄汁的清除DPPH自由基以及ABTS自由基的能力加强。另外,在室温及光照48天的条件下,加入羟基酪醇的番茄汁表现稳定。羟基酪醇的浓度升高到1mg/mL时番茄汁的风味和颜色仍然保持不变。这种加入羟基酪醇的番茄汁既拥有番茄的营养,还引入了羟基酪醇的生物活性,因此是一种非常有发展潜力的健康食品


西班牙人Juan FernandezBolanos用加热的方法处理油橄榄提取橄榄油后的副产物(橄榄渣及废水的混合物)发现加热可以提高羟基酪醇的含量。他提出一种经济适用的纯化羟基酪醇的方法,但是已经申请专利。
国外克雷农业公司及国内刘岱玲从橄榄提取液中提取出羟基酪醇,但是他们都也已经申请专利保护。

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