膳食纤维(DF)被称为“第七大营养素”,是天然存在的或者合成的碳水化合物的聚合物,主要存在于植物细胞壁中,不能被人体消化吸收,也不能为人体提供能量,但其对于人体膳食平衡起到至关重要的作用。按照是否溶于水可将DF分为可溶性膳食纤维(SDF)和不可溶性膳食纤维(IDF)。金针菇中的DF含量丰富,同时富含SDF和IDF,具有一定的抗氧化和抗衰老功效,因此研究金针菇DF对产品开发利用具有非常重要的参考价值。
山东省农业科学院农产品加工与营养研究所,山东省农产品精深加工技术重点实验室,农业农村部新食品资源加工重点实验室的刘学成、王文亮、贾凤娟*等人以提取的金针菇DF为原料,对其进行改性处理,分别采用纤维素酶法和高温蒸煮法处理金针菇DF,在单因素试验基础上得到最佳改性工艺优化参数。此外,对两种改性方法处理的金针菇DF进行理化性质测定,并通过扫描电子显微镜观察和傅里叶变换红外光谱分析,选出较优的改性方法。最后,建立高脂肥胖小鼠模型,通过饲喂改性后的金针菇DF饲料,探究改性DF对小鼠血脂和血清抗氧化指标的影响。
1、纤维素酶改性和高温蒸煮改性对金针菇SDF得率影响的单因素试验结果
纤维素酶改性对金针菇SDF得率的影响
由图1可以看出,随着液料比、纤维素酶用量的提高与酶解时间的延长,SDF得率均呈现先升后降的趋势,液料比在30∶1时,SDF得率最高(16.6%);综合考虑选取液料比25∶1、30∶1、35∶1作为正交试验3个水平。当纤维素酶用量为1.5%时,SDF得率最高(16.1%);纤维素酶量过量时,部分SDF也会被分解,综合考虑选取纤维素酶用量1.0%、1.5%、2.0%作为正交试验3个水平。纤维素酶酶解时间为1.5 h时,SDF得率最高(15.8%);当酶解时间继续延长时,会造成纤维素酶的过度酶解,导致SDF得率降低,综合考虑选取酶解时间1.0、1.5、2.0 h作为正交试验3个水平。
高温蒸煮改性对金针菇SDF得率的影响
由图2可以看出,当液料比为30∶1时,SDF得率最高(20.5%)。综合考虑选取液料比25∶1、30∶1、35∶1作为正交试验3个水平。随着蒸煮温度的升高,SDF得率呈现先增加后趋于稳定的趋势,当蒸煮温度为120 ℃时,SDF得率最高(20.6%),高温会破坏DF分子内氢键,部分结晶区遭到破坏促使部分IDF转变为SDF,当蒸煮温度高于120 ℃时,SDF得率趋于稳定。综合考虑选取蒸煮温度115、120、125 ℃作为正交试验3个水平。
2、金针菇DF改性工艺参数优化
表3为纤维素酶改性正交试验设计与结果,表4为高温蒸煮改性正交试验设计与结果。根据表3中的极差(R)分析得出各因素对金针菇改性SDF得率影响的主次顺序为B>C>A,即纤维素酶用量>酶解时间>液料比。最佳改性工艺组合是A3B2C3,即液料比35∶1、纤维素酶用量1.5%、酶解时间2.0 h,按照此方案进行验证试验,得到SDF得率为16.2%。
从表4中的极差(R)分析得出各因素对金针菇改性SDF得率影响的主次顺序为B>C>A,即蒸煮温度>蒸煮时间>液料比。最佳改性工艺组合是A 2 B 3 C 3 ,即液料比30∶1、蒸煮温度125 ℃、蒸煮时间50 min,按照此方案进行验证实验,SDF得率为20.4%。由此可以看出高温蒸煮改性SDF得率高于纤维素酶改性。
3、金针菇膳食纤维改性前后理化性质
从图3可以看出,NaOH溶液消耗体积为0~1 mL时,几种方法处理的溶液pH值上升都较慢,NaOH溶液消耗体积为1~3 mL时,几种方法处理的溶液pH值上升较快,其中高温蒸煮处理溶液pH值上升最快,pH值为7时NaOH溶液消耗体积为1.6 mL,纤维素酶处理溶液在pH值为7时NaOH溶液消耗体积为1.7 mL,未改性处理的溶液pH值为7时NaOH溶液消耗体积为2 mL,当NaOH溶液消耗体积超过3 mL时,几种溶液的pH值缓慢上升直至接近11。在相同pH值条件下,NaOH溶液消耗体积越小则阳离子交换能力越强。由此可以看出阳离子交换能力依次为高温蒸煮改性组>纤维素酶改性组>未改性组。
从图4中可以看出,纤维素酶改性法和高温蒸煮改性法都能明显提高DF的葡萄糖吸收能力,葡萄糖吸收能力从10.2 mmol/g分别提高到16.8 mmol/g和18.3 mmol/g,葡萄糖吸收能力由大到小依次为高温蒸煮改性组>纤维素酶改性组>未改性组。
如图5所示,纤维素酶改性法和高温蒸煮改性法都能明显提高胆固醇吸附力,胆固醇吸附力从5.1 mg/g分别上升到9.8 mg/g和10.1 mg/g。胆固醇吸附力由大到小依次为纤维素酶改性组>高温蒸煮改性组>未改性组。
4、金针菇DF改性前后的微观结构
如图6所示,3 种方法处理的DF结构差别较大。未改性处理的DF结构较为紧密;经过纤维素酶改性处理的DF结构中孔状结构较多,可能是DF主要成分为纤维素,纤维素酶分解一部分纤维素转变为SDF所致;而高温蒸煮改性处理的DF结构表面疏松多孔,且表面多呈现丝状结构,原因可能是高温迫使DF结构发生改变,使得相当一部分IDF转换成SDF溶解在水中。
5、金针菇DF改性前后傅里叶变换红外光谱分析结果
如图7所示,3 种方法处理的DF在吸收峰上没有明显的变化,在3 400 cm -1 附近出现一个较宽的吸收峰,是典型的纤维素和半纤维素O—H伸缩振动带,说明存在分子间的氢键作用力,在2 900 cm -1 附近出现一个较弱的吸收峰,主要由糖类亚甲基上的C—H基团伸缩振动引起,在1 630 cm -1 处出现木质素中芳香苯基团产生的吸收峰。
6、小鼠高脂肥胖模型造模结果
由表5可知,高脂肥胖模型组与空白对照组体质量和TG、TC、HDL-C、LDL-C水平均有极显著差异,说明小鼠造模成功。
7、金针菇膳食纤维对高脂肥胖小鼠各项生理指标的影响
膳食纤维对高脂肥胖模型小鼠体质量的影响
从表6可以看出,实验组与模型组初始体质量无明显差异,随着时间的推移,各实验组与模型组开始出现差异性,从第2周开始,DF中剂量组和高剂量组小鼠体质量显著低于模型组体质量(P<0.05),从第3周开始,阳性对照组、DF中剂量组和DF高剂量组体质量极显著低于模型组小鼠(P<0.01),第4周DF低剂量组小鼠体质量显著低于模型组小鼠(P<0.05)。
膳食纤维对高脂肥胖模型小鼠的血脂水平影响
由表7可知,模型组中TG、TC和LDL-C浓度显著高于空白对照组,而HDL-C浓度显著低于空白对照组,说明食用高脂饲料导致模型组小鼠血脂水平异常。
膳食纤维对高脂肥胖模型小鼠血清抗氧化指标的影响
如表8所示,模型组与DF低剂量组血清SOD活力极显著低于空白对照组(P<0.01),与模型组相比,阳性对照组、DF中剂量组和DF高剂量组能极显著提高血清中SOD活力(P<0.01)。与空白对照组相比,模型组和DF低剂量组血清GSH-Px活力极显著降低(P<0.01),阳性对照组血清GSH-Px活力极显著升高(P<0.01);与模型组相比,其余组别GSH-Px活力极显著升高(P<0.01)。
结 论
本实验采用纤维素酶法和高温蒸煮法对DF进行改性,在单因素试验基础上得到改性最佳工艺优化参数,纤维素酶法按照最佳优化水平组合验证,测得SDF得率为16.2%;高温蒸煮法按照最佳优化水平组合验证,测得SDF得率为20.4%,表明高温蒸煮法获得的SDF得率较高。将两种处理方法得到的DF与未改性改性的DF进行理化性质对比,发现高温蒸煮法改性DF在阳离子交换力、胆固醇吸附力和葡萄糖吸收能力均优于纤维素酶法改性DF。此外,扫描电显微镜镜观察和傅里叶变换红外光谱分析结果表明,高温蒸煮改性法所得SDF微观结构更加疏松多孔,透光率更高,与理化性质分析结果一致。最后建立小鼠高脂肥胖模型,通过饲喂3 种含不同剂量的DF饲料,探究金针菇DF对高脂肥胖模型小鼠生理指标的影响,结果表明金针菇DF对高脂肥胖模型小鼠的体质量、血脂以及血清抗氧化等各项指标均有显著的改善效果。
本文《金针菇膳食纤维改性、理化性质及抗氧化、降血脂活性》来源于《食品科学》2021年42卷23期90-98页,作者:刘学成,王文亮,弓志青,王延圣,崔文甲,宋莎莎,张剑,贾凤娟。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20201020-199。点击下方阅读原文即可查看文章相关信息。
修改/编辑:袁艺;责任编辑:张睿梅
图片来源于文章原文及摄图网
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